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大腸桿菌轉(zhuǎn)化與感受態(tài)細(xì)胞的制備方法的研究進(jìn)展

時(shí)間:2016-7-20閱讀:585
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大腸桿菌細(xì)胞表面沒(méi)有結(jié)合DNA的特異性受體存在,金屬離子誘導(dǎo)大腸桿菌攝取外源DNA具有一定的特異性。高濃度非生理?xiàng)l件下Ca2+誘導(dǎo)大腸桿菌攝取外源DNA,可能一方面是高濃度的Ca2+聚集在細(xì)胞表面改變了細(xì)胞壁的滲透性,使轉(zhuǎn)化DNA更容易接近細(xì)胞膜。另一方面少量Ca2+進(jìn)入細(xì)胞與胞內(nèi)的PHB和Pi結(jié)合成復(fù)合物,在細(xì)胞膜上形成新的膜通道,為DNAzui終進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)提供了條件。低Ca2+誘導(dǎo)大腸桿菌攝取DNA可能主要是后者的作用。因此,Ca2+誘導(dǎo)大腸桿菌建立感受態(tài)并實(shí)現(xiàn)DNA轉(zhuǎn)化,既是一個(gè)物理化學(xué)過(guò)程,也是細(xì)胞自身生理調(diào)節(jié)的反應(yīng)過(guò)程。這些研究結(jié)果對(duì)于我們探索大腸桿菌攝取外源DNA的分子機(jī)理,提高基因工程操作中將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞的效率,以及正確評(píng)估大腸桿菌可能發(fā)生的水平基因轉(zhuǎn)移事件具有重要意義。

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