【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱:EBTr(NBL-4)（牛胚氣管細(xì)胞）操作步驟

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

背景描述

EBTr(NBL-4)細(xì)胞牛痢疾病毒(BVDV)陰性。

生長(zhǎng)培養(yǎng)基

MEM(貨號(hào):PM150410)＋10% FBS(貨號(hào):164210-500)＋1% P/S(貨號(hào):PB180120)

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

EBTr(NBL-4)（牛胚氣管細(xì)胞）操作步驟冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
EBTr(NBL-4)（牛胚氣管細(xì)胞）操作步驟操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
EBTr(NBL-4)（牛胚氣管細(xì)胞）操作步驟優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問(wèn)題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過(guò)五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過(guò)一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β-HSD抗體 HSD3B1
乙?；M蛋白H4抗體 Acetyl-Histone H4(K8)
磷酸化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1 phospho-HMGN1(Ser20+Ser24)
附睪分泌蛋白4抗體 HE4
*基化組蛋白H3抗體 Histone H3 (Tri Methyl K4)
三羥基*基*還原酶抗體 HMGCR
硫酸乙酰肝素蛋白多糖2 Heparan Sulfate Proteoglycan 2
肝癌相關(guān)抗原h(huán)ca25a HCA25a
己糖激酶3抗體 Hexokinase 3
人乙肝病毒pre S1/S2蛋白抗體 HBV pre S1 protein
人乙肝病毒pre S1蛋白抗體 HBV pre S1 protein
己糖激酶1抗體 Hexokinase 1
己糖激酶2抗體 Hexokinase 2
熱休克蛋白90α抗體 HSP90 alpha
肝細(xì)胞源性纖維蛋白原相關(guān)蛋白1抗體 HFREP1
紅細(xì)胞分化相關(guān)基因蛋白抗體 Hemogen
同源異型盒基因HOXA13抗體 HOXA13
磷酸化組蛋白去乙?；?(Ser246)抗體 Phospho-HDAC4 (Ser246)
磷酸化組蛋白去乙?；?抗體 Phospho-HDAC7(Ser155)
磷酸化組蛋白去乙?；?抗體 phospho-HDAC4 (Ser632)
磷酸化組蛋白去乙?；?抗體 phospho-HDAC7(Ser486)
HIRA相互作用蛋白3抗體 HIRIP3
HOOK1蛋白抗體 HOOK1
人類免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp41+gp160抗體 HIV2 gp41 + gp160
人類免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp41+gp160抗體 HIV2 gp120 + gp160
HCG3蛋白抗體 HCG3
HER4抗體 ErbB4
記磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體IgG 純化大鼠腎上腺髓質(zhì)素（AM）基因重組表達(dá)載體（pGEFP-AM）測(cè)序引物對(duì)  0.2ml
Ai-Tat/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞*轉(zhuǎn)氨酶抗體IgG 大鼠腎上腺髓質(zhì)素（AM）基因重組表達(dá)載體（pGEFP-AM）感受態(tài)菌DH-5α  0.2ml
Ai-TBX2/T-box2/FITC  熒光素標(biāo)記新型抑癌基因抗體IgG 人體RUNX3（AML-2）基因cDNA產(chǎn)物  0.2ml
EBTr(NBL-4)（牛胚氣管細(xì)胞）操作步驟Ai-TBX2/T-box2/FITC  熒光素標(biāo)記新型抑癌基因抗體IgG 人體RUNX3（AML-2）基因引物對(duì)  0.2ml
Ai-TCF7L2/FITC  熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體IgG 純化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體（pCMV5－RUNX3）  0.2ml
Ai-TCRG/FITC  熒光素標(biāo)記抗T細(xì)胞受體γ抗體IgG 純化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體（pCMV5－RUNX3）測(cè)序引物對(duì)  0.2ml
Ai-TDAG51/FITC  熒光素標(biāo)記TDAG51抗體IgG 人體RUNX3基因重組表達(dá)載體（pCMV5－RUNX3）感受態(tài)菌DH-5α  0.2ml
Ai-TDP-43/TARDBP /FITC  熒光素標(biāo)記Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗體IgG 純化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體（pcDNA-RUNX3）  0.2ml
Ai-TBX3/FITC  熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體IgG 純化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體（pcDNA-RUNX3）測(cè)序引物對(duì)  0.2ml
Ai-omerase Binding Protein，P23/FITC  熒光素標(biāo)記端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體IgG 人體RUNX3基因重組表達(dá)載體（pcDNA-RUNX3）感受態(tài)菌DH-5α  0.2ml
Ai-Tbx21/T-bet/FITC  熒光素標(biāo)記T細(xì)胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Tbx21抗體IgG 純化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體（pGEFP-RUNX3）  0.2ml
Ai-TEM 1/CD248/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液酸蛋白抗體IgG 純化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體（pGEFP-RUNX3）測(cè)序引物對(duì)  0.2ml
Ai-TEM8/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體IgG 人體RUNX3基因重組表達(dá)載體（pGEFP-RUNX3）感受態(tài)菌DH-5α  0.2ml
Ai-Tenascin C/FITC  熒光素標(biāo)記固生蛋白抗體IgG pcDNA3.1＋目的基因  0.2ml
Ai-Tenascin/TN /FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞粘合素抗體