細(xì)胞名稱:LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞)實(shí)驗(yàn)方法
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
背景描述
LLC-MK2細(xì)胞源自6只成年綠猴的腎細(xì)胞懸液。據(jù)報(bào)道,LLC-MK2細(xì)胞對很多病毒敏感,包括腸道病毒、鼻病毒、粘病毒和痘病毒家族中的成員。
生長培養(yǎng)基
MEM(貨號:PM150410)+10% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120)
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
細(xì)胞名稱 | LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞)實(shí)驗(yàn)方法 |
規(guī)格 | 5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
價(jià)格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
優(yōu)勢:
1、細(xì)胞株種類齊全,包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*,專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株,免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片,三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片,五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā),超過五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià),超過一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,優(yōu)秀的科研隊(duì)伍,*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
sulphate protoglycans 1
叉頭蛋白J1抗體 HFH-4
艾滋病病毒抗體 HIV p55+NP7
艾滋病病毒抗體 HIV p55+P6-Gag
艾滋病病毒抗體 HIV1 p55+p17
結(jié)合珠蛋白相關(guān)蛋白抗體 HPR
L-*脫羧酶抗體 HDC
乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白 HBXIP
組蛋白H2B.s抗體 Histone H2B.s
組蛋白去乙?;?+5+9抗體 HDAC4 + 5 + 9
熱休克蛋白27相關(guān)蛋白1抗體 HSPBAP1
卟膽原脫氨酶抗體 HMBS
異質(zhì)核糖核蛋白U2樣蛋白抗體 HORMAD2
肝癌衍生生長因子2抗體 HRP2
肝癌相關(guān)抗原57抗體 HCA57
補(bǔ)體C3抗體 Complement C3
甲型流感病毒血凝素抗體 H1N1 Hemagglutinin 2
甲狀旁腺功能亢進(jìn)蛋白2/細(xì)胞分裂周期73抗體 HRPT2
線粒體*蛋白酶抗體 HTRA2
鉀/鈉超極化激活環(huán)核苷酸門控通道蛋白2抗體 HCN2
熱休克蛋白β7抗體 HSPβ7
鉀/鈉超極化激活環(huán)核苷酸門控通道蛋白3抗體 HCN3
鐵調(diào)節(jié)蛋白25抗體 Hepcidin-25
HD域內(nèi)含蛋白2抗體 HDDC2
艾滋病病毒p55抗體 HIV1 p55 + p17
造血細(xì)胞激酶抗體 Hck
HEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白5B蛋白抗體 HEATR5B
缺氧誘導(dǎo)基因1B蛋白抗體 HIGD1B
乙?;M蛋白H4抗體 Acetyl-Histone H4(K5)
熱休克蛋白B2抗體 HSPB2
人類白細(xì)胞抗原B27 HLA B27
螺旋環(huán)螺旋轉(zhuǎn)錄因子HATH6抗體 Protein atonal homolog 8
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1β2抗體 HRG1
HDHD3蛋白抗體 HDHD3
子–β受體1抗體IgG 正常女性人體肝組織S9組分(5毫克/毫升) 0.2ml
Ai-TGF- BetaR 2/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)移生長因子–β受體2抗體IgG 吸煙者人體肺組織S9組分(5毫克/毫升) 0.2ml
Ai-TGF- BetaR 3/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)移生長因子–β受體3抗體IgG 非吸煙者人體肺組織S9組分(5毫克/毫升) 0.2ml
Ai-TGM3/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)谷氨酰酶3抗體IgG 正常人體腸組織S9組分(5毫克/毫升) 0.2ml
Ai-Thioredoxin 1/FITC 熒光素標(biāo)記硫氧還蛋白抗體IgG 正常人體腎組織S9組分(5毫克/毫升) 0.2ml
Ai-Thymosin Alpha-1/FITC 熒光素標(biāo)記* α-1抗體IgG 正常男性人體肝組織微粒體組分(5毫克/毫升) 0.2ml
Ai-Tie1/FITC 熒光素標(biāo)記血管生成素-1受體抗體IgG 正常女性人體肝組織微粒體組分(5毫克/毫升) 0.2ml
Ai-Tie2/FITC 熒光素標(biāo)記上皮生長因子樣域*激酶2IgG 吸煙者人體肺組織微粒體組分(5毫克/毫升) 0.2ml
Ai-Phospho-Tie2 (Tyr992) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化血管生成素受體2抗體IgG 非吸煙者人體肺組織微粒體組分(5毫克/毫升) 0.2ml
Ai-Phospho-Tie2 (Ser1119) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化血管生成素受體2抗體IgG 正常人體腸組織微粒體組分(5毫克/毫升) 0.2ml
Ai-TIEG1/KLF10/FITC 熒光素標(biāo)記TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗體IgG 正常人體腎組織微粒體組分(5毫克/毫升) 0.2ml
Ai-RALDH2/FITC 熒光素標(biāo)記*脫氫酶2型抗體IgG 正常大鼠(Sprague Dawley)肝組織微粒體組分(5 毫克/毫升) 0.2ml
ai-RARRES1/TIG1/FITC 熒光素標(biāo)記*受體應(yīng)答蛋白1抗體IgG 正常大鼠(Sprague Dawley)肺組織微粒體組分(5毫克/毫升) 0.2ml
Ai-TIGAR humen/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人TIGAR蛋白抗體IgG 正常大鼠(Sprague Dawley)腸組織微粒體