【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 犬腎細(xì)胞；MDCK/IgR培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
| 產(chǎn)品名稱 | 犬腎細(xì)胞；MDCK/IgR培養(yǎng) |
| 貨期 | 3－5天 |
| 發(fā)貨地 | 上海 |
復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人GDP解離抑制因2(GdI2)免疫試劑盒 Human GdI2 ELISA kit
人GAD/IA2自身抗體免疫試劑盒 Human GAD/IA2 combined autoantibody ELISA kit
人G1/S特異性細(xì)胞周期蛋白E1(CCNE1)免疫試劑盒 Human CCNE1 ELISA kit
人F-肌動(dòng)蛋白(F-actin)免疫試劑盒 Human F-actin ELISA Kit
人FOS 樣抗原2(FOSL2)免疫試劑盒 Human FOSL2 ELISA Kit
人FMS樣*激酶3配體(Flt-3L)免疫試劑盒 Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L ELISA Kit
人FMS樣*激酶3(Flt3)免疫試劑盒 Human FMS-like tyrosine kinase 3,Flt3 ELISA Kit
人Fc受體樣蛋白3(FCRL3)免疫試劑盒 Human FCRL3 ELISA kit
人FAM172A蛋白(FAM172A)免疫試劑盒 Human Protein FAM172A(FAM172A) ELISA kit
人E選擇素(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒 Human E-Selectin ELISA kit
人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)免疫試劑盒 Human E-Cad ELISA Kit*基硅烷基三氟磺酸酯 Trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate 27607-77-8
異氰酸*基硅酯 TRIMETHYLSILYL ISOCYANATE 1118-02-1
*基乙醛 Trimethylacetaldehyde 630-19-3
三聚甲醛 s-Trioxane 110-88-3
1,2,3-三氯丙烷 1,2,3-Trichloropropane;Glycerol trichlorohydrin 96-18-4
三氯化鈦溶液 Titanous chloride 7705/7/9
三氯 Benzotrichloride 1998/7/7
三十七烷 N-HEPTATRIACONTANE 7194-84-5
亞甲基藍(lán) Methylene Blue trihydrate 7220-79-3
四甘醇 Bis[2-(2-hydroxyethoxy)ethyl] ether 112-60-7
三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基（TSI） NA
甲基三辛基氯化銨;三辛基甲基氯化銨 MethyltrioctylaMMoniuM chloride 5137-55-3
