人白細(xì)胞分離液 1.078200mL實(shí)驗(yàn)方法使用方法:
1、 稱取 0.1-0.5g 植物組織(如果是葉片,一般用 0.2g 即可;如果是含水分多的 果實(shí),一般用 0.3-0.5g;如果是種子,一般用 0.1g 即可),放入液氮中研磨 成粉末。
2、 加入 1 mL 溶液 A,在冰上繼續(xù)研磨至成糊狀。注意:如果樣品富含蛋白酶, 還可以在溶液 A 中加入相應(yīng)的蛋白酶抑制劑(自備)。
3、 將研磨液轉(zhuǎn)移到一個(gè)干凈的 1.5mL 塑料離心管中,顛倒混勻后 4℃ 15000g 離心 15 分鐘。
4、 將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的 1.5mL 塑料離心管中。
5、 加入 100 uL 溶液 B,顛倒混勻。
6、 在冰上放置 15 分鐘或在-20℃冰箱過夜。
7、 4℃ 15000g 離心 15 分鐘,小心移棄上清液。
8、 向沉淀物加入 1mL -20℃預(yù)冷的溶液 C,震蕩混合。
9、 4℃ 15000g 離心 10 分鐘,移棄上清液。
10、重復(fù)步驟 8 和 9 一次
11、加入 1mL -20℃預(yù)冷的溶液 D,震蕩混合后 4℃ 15000g 離心 10 分鐘,去 凈上清液。
12、冷凍干燥 1~2 分鐘,沉淀即可放冰箱保存或加入 200uL 自備的等電聚焦上樣 液在室溫下(溫度不要超過 30℃)溶解 30 分鐘,再室溫 10000g 離心 2 分 鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的 1.5mL 塑料離心管中。后續(xù)試驗(yàn)包括 Bradford 蛋白定量和 2D 電泳。2D 電泳對蛋白上樣量要求十分嚴(yán)格,因此強(qiáng)烈建議用 戶在進(jìn)行 2D 電泳前測定所得蛋白的濃度。
人白細(xì)胞分離液 1.078200mL實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品及特點(diǎn):
蛋白質(zhì)樣品的制備是 2D 電泳成功的關(guān)鍵,尤其是對植物材料,因?yàn)橹参锊牧?不但有堅(jiān)硬的細(xì)胞壁,還含有大量的、可以干擾 2D 電泳的物質(zhì)(如多糖、脂類、 多酚、次生代謝物等)。本產(chǎn)品就是專門針對這一困難而開發(fā),它有下列特點(diǎn):
1. 可以處理各種植物材料(葉片、種子、果實(shí)等),包括新鮮或凍干的材料。
2. 操作簡單,只有振蕩和離心等簡單步驟。 3. 能有效去除植物樣品中常見的、干擾 2D 電泳的物質(zhì)。
產(chǎn)品介紹:
BamHI 堿性品紅 5g
1.5 mL RNase-free 離心管 維生素 E 5g
BglII 甜菜堿鹽酸鹽 100g
2.0 mL RNase-free 離心管 氨甲喋呤 10mg
DpnI 5- 溴 -2'- 脫氧尿苷 100mg
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝 ) D- 半乳糖 25g
EcoRI * 5g
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝長尖 ) L- *鹽酸鹽 25g
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝帶芯 ) 異硫氰酸胍 25g
EcoRV 維生素 B1 10g
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝帶芯長尖 ) 二乙酸熒光素 1g
HindIII * 25g
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝 ) * A 5mg
HinfI α- 乳糖 100g
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝長尖 ) 3-(3,4- 二羥基苯 )-L- * 5g
KpnI 乙二胺四乙酸 (EDTA) 100g
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:無色片狀或針狀結(jié)晶。1g溶于10ml沸水或10ml熱乙醇、37.5ml沸苯。易溶于稀的堿性或酸性溶液,幾乎不溶于乙迷和石油醚。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)顯影劑。
〖保存〗:RT,避光
α-萘酚苯甲醇
〖英文名稱〗:α-Naphtholbenzein;4,4′-(α-Hydroxybenzylidene)di-1-naphthol;p-Naphtholbenzein
〖其他名稱〗:α-納富妥苯;4-[(4-羥基-1-萘基)苯基亞甲基]-1(4H)-萘酮;α-對萘酚苯;對萘酚苯甲醇;4,4’-(α-羥基亞芐基)二(1-萘酚);α-萘酚基萘酚醌基苯甲烷;α-萘酚醌苯基甲烷;α-萘酚醌烷;α-萘酚苯;1-萘酚苯;α-苯甲醇萘
〖CAS號〗:145-50-6
C27H18O2=374.43
〖級別〗:IND
純度:≥90.0%
pH變色域: 8.2(橙,黃)~9.8(藍(lán),綠)
〖熔點(diǎn)〗:230~235℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:紅棕色或暗紅色或褐色粉末。對二氧化碳和酸非常靈敏。溶于乙醇、乙迷、苯和冰乙酸,不溶于水。有刺激性。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑,pH 8.5(黃)~9.8(綠)。
〖保存〗:RT,避光
ilori blue;Steel blue;Pigment blue 27;Hamburg blue;Berlin blue;Mineral blue