人 NK 細(xì)胞分離液 1.062200mL實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品介紹:
人 NK 細(xì)胞分離液 1.062200mL實(shí)驗(yàn)方法規(guī)格及成分:
使用方法:
1、 稱(chēng)取 0.1-0.5g 植物組織(如果是葉片,一般用 0.2g 即可;如果是含水分多的 果實(shí),一般用 0.3-0.5g;如果是種子,一般用 0.1g 即可),放入液氮中研磨 成粉末。
2、 加入 1 mL 溶液 A,在冰上繼續(xù)研磨至成糊狀。注意:如果樣品富含蛋白酶, 還可以在溶液 A 中加入相應(yīng)的蛋白酶抑制劑(自備)。
3、 將研磨液轉(zhuǎn)移到一個(gè)干凈的 1.5mL 塑料離心管中,顛倒混勻后 4℃ 15000g 離心 15 分鐘。
4、 將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的 1.5mL 塑料離心管中。
5、 加入 100 uL 溶液 B,顛倒混勻。
6、 在冰上放置 15 分鐘或在-20℃冰箱過(guò)夜。
7、 4℃ 15000g 離心 15 分鐘,小心移棄上清液。
8、 向沉淀物加入 1mL -20℃預(yù)冷的溶液 C,震蕩混合。
9、 4℃ 15000g 離心 10 分鐘,移棄上清液。
10、重復(fù)步驟 8 和 9 一次
11、加入 1mL -20℃預(yù)冷的溶液 D,震蕩混合后 4℃ 15000g 離心 10 分鐘,去 凈上清液。
12、冷凍干燥 1~2 分鐘,沉淀即可放冰箱保存或加入 200uL 自備的等電聚焦上樣 液在室溫下(溫度不要超過(guò) 30℃)溶解 30 分鐘,再室溫 10000g 離心 2 分 鐘,將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的 1.5mL 塑料離心管中。后續(xù)試驗(yàn)包括 Bradford 蛋白定量和 2D 電泳。2D 電泳對(duì)蛋白上樣量要求十分嚴(yán)格,因此強(qiáng)烈建議用 戶(hù)在進(jìn)行 2D 電泳前測(cè)定所得蛋白的濃度。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
蛋白質(zhì)樣品的制備是 2D 電泳成功的關(guān)鍵,尤其是對(duì)植物材料,因?yàn)橹参锊牧?不但有堅(jiān)硬的細(xì)胞壁,還含有大量的、可以干擾 2D 電泳的物質(zhì)(如多糖、脂類(lèi)、 多酚、次生代謝物等)。本產(chǎn)品就是專(zhuān)門(mén)針對(duì)這一困難而開(kāi)發(fā),它有下列特點(diǎn):
1. 可以處理各種植物材料(葉片、種子、果實(shí)等),包括新鮮或凍干的材料。
2. 操作簡(jiǎn)單,只有振蕩和離心等簡(jiǎn)單步驟。 3. 能有效去除植物樣品中常見(jiàn)的、干擾 2D 電泳的物質(zhì)。
蛋白去除試劑 S 甲醇 500mL
鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶測(cè)試盒 二甲基亞砜 100mL
肝 / 肌糖元測(cè)試盒 二甲基亞砜 ( 細(xì)胞培養(yǎng) ) 50mL
*測(cè)試盒 維生素 D3 1g
*過(guò)氧化物酶檢測(cè)試劑盒 氯吡苯脲 1g
*還原酶檢測(cè)試劑盒 維生素 B12 1g
*一還原酶測(cè)試盒 水解乳蛋白 100g
過(guò)氧化氫測(cè)試盒 二硫赤蘚醇 1g
過(guò)氧化氫定量分析試劑盒 ( 水兼容性 ) 次黃嘌呤 1g
過(guò)氧化氫定量分析試劑盒 ( 脂兼容性 ) 瑞氏色素 5g
過(guò)氧化氫酶測(cè)試盒 ( 可見(jiàn)光比色法 ) DL- 蘋(píng)果酸 100g
紅細(xì)胞 NADH 高鐵血紅蛋白還原酶測(cè)試盒 氨芐*鈉 5mg
琥珀酸脫氫酶測(cè)試盒 * G 鈉鹽 1g
活性氧 ( 羥自由基 ) 測(cè)試盒 ( 比色法 ) D- * 250g
活性氧檢測(cè)試劑盒 水楊酸 25g
肌酸激酶測(cè)試劑盒 雙 (2- 羥乙基 ) 亞氨基三 ( 羥甲基 ) 甲烷 5g
堿性磷酸酶測(cè)試劑盒 5,5- 二硫代雙 (2- 硝基苯甲酸 ) 1g
1.本品0.1g溶于100ml水中,呈黃色澄清溶液。
2.本品微溶于乙醇,不溶于油脂,具有酸性染料的特性,能使動(dòng)物纖維著色。
3.100ml含有0.001g本品的0.02mol/L乙酸銨溶液,其zui大吸收波長(zhǎng)為482±2nm。
4.取本品水溶液做紙上層析,其主色點(diǎn)的Rf值應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)樣品相同。
紙上層析條件:
展開(kāi)劑:正丁醇:無(wú)水乙醇:氨水(1%)=6:2:3
溫度:20~25℃
試液濃度:0.1g/100ml
試液用量:0.002ml
展開(kāi)劑前沿上升限度:150mmm
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:橙紅色均勻粉末或顆粒,無(wú)臭。易溶于水(6.9%,0℃)、甘油、丙二醇,微溶于乙醇、不溶于油脂。水溶液呈黃橙色。在檸檬酸、酒石酸中穩(wěn)定,還原時(shí)褪色。0.1%水溶液呈橙黃色。耐光性,耐熱性,耐酸性非常強(qiáng),耐堿性尚好,但遇堿呈紅褐色。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
ferrocyanide