【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱  人正常肺上皮細(xì)胞；BEAS-2B使用說明書
形態(tài)特性   上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng)
特征特性   從一位非癌個(gè)體的正常人支氣管上皮病理切片分離出上皮細(xì)胞。 這些細(xì)胞用腺病毒12-SV40病毒雜交病毒感染并克隆。 DEAS-2B細(xì)胞保留了對(duì)血清反應(yīng)進(jìn)行鱗關(guān)分化的能力，并有用于篩選誘導(dǎo)或影響分化及致癌的化學(xué)或生物制劑。 細(xì)胞角蛋白及SV40抗原染色陽性。 
培養(yǎng)條件    
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況  P(39+5)
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè)  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

復(fù)蘇操作要點(diǎn)： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。 
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
GRM4    英文名稱：    促代謝型*受體4抗體    ?0.1ml
GST tag    英文名稱：    GST標(biāo)簽蛋白抗體    ?0.1ml
Glypican 4    英文名稱：    磷脂酰基醇蛋白聚糖-4抗體    ?0.2ml
Cobra poison Protein    英文名稱：    眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體    ?0.2ml
GALNT14    英文名稱：    GalNAc-T14抗體    ?0.2ml
GREM2    英文名稱：    骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白2抗體    ?0.1ml
GPAT4    英文名稱：    甘油?；D(zhuǎn)移酶4抗體    ?0.2ml
GLUT12    英文名稱：    葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12抗體    ?0.2ml
GNLY/NKG5    英文名稱：    顆粒溶素抗體    ?0.1ml
GLI1    英文名稱：    腦膠質(zhì)瘤相關(guān)蛋白抗體（鋅指蛋白5）    ?0.1ml
GRO gamma/CXCL3    英文名稱：    生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因gamma（GRＯγ）抗體    ?0.1ml
GPSM2    英文名稱：    G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白2抗體    ?0.2ml
GPR142     英文名稱：    G蛋白偶聯(lián)受體GPR142蛋白抗體    ?0.2mlF VII (Human coagulation factor VII ) ELISA Kit  人*Ⅶ    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
sHLA-G(Human soluble human leucocyte antigen G1) ELISA Kit  人可溶白細(xì)胞抗原G    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
PT(Human Prothrombin0 ELISA Kit  人*原    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
CFD(Human complement factor D) ELISA Kit  人補(bǔ)體因子D    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
pFN(Human Plasma fibronectin) ELISA kit  人血漿纖維連接蛋白    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
cFn(Human cellular fibronectin) ELISA kit  人細(xì)胞纖維連接蛋白    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
TPS(Human Total protein S) ELISA Kit  人總蛋白S    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
SDPR(human serum deprivation response) ELISA Kit  人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
HNP1-3(Human neutrophil peptide 1-3) ELISA Kit  人中粒細(xì)胞防御素1-3    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
ECP(Human eosinophil cationic protein) ELISA Kit  人嗜酸粒細(xì)胞陽離子蛋白    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
PS(Human plasma anticoagulant protein S) ELISA Kit  人血漿抗凝蛋白S    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
PC(Human plasma anticoagulant protein C) ELISA Kit  人血漿抗凝蛋白C    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T