產(chǎn)品描述:
細(xì)胞名稱 人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B圖片
形態(tài)特性上皮細(xì)胞樣
生長特性貼壁生長
特征特性從一位非癌個(gè)體的正常人支氣管上皮病理切片分離出上皮細(xì)胞。這些細(xì)胞用腺病毒12-SV40病毒雜交病毒感染并克隆。DEAS-2B細(xì)胞保留了對血清反應(yīng)進(jìn)行鱗關(guān)分化的能力,并有用于篩選誘導(dǎo)或影響分化及致癌的化學(xué)或生物制劑。細(xì)胞角蛋白及SV40抗原染色陽性。
培養(yǎng)條件
傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況P(39+5)
凍存條件*培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
冷凍保存細(xì)胞之方法:
人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B圖片準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
IL-10*豬白介素10規(guī)格48T/96T
IL-1*豬白介素1規(guī)格48T/96T
IFN-γ*豬γ干擾素規(guī)格48T/96T
IFN-β/IFNB*豬β干擾素規(guī)格48T/96T
IFN-α*豬α干擾素規(guī)格48T/96T
D2D*豬D二聚體規(guī)格48T/96T
D2D*豬D二聚體規(guī)格48T/96T
CRP*豬C反應(yīng)蛋白規(guī)格48T/96T
Bcl-2*豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2規(guī)格48T/96T
BAX*豬Bcl-2相關(guān)X蛋白規(guī)格48T/96T
人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B圖片AnnexinⅢpeptide膜粘連蛋白A3抗體AnnexinⅢpeptide膜粘連蛋白A3抗體0.5mgAnnexinⅢpeptide膜粘連蛋白A3抗體
AnnexinA膜粘連蛋白A抗原AnnexinA膜粘連蛋白A抗原0.5mgAnnexinA膜粘連蛋白A抗原
AnnexinII膜粘連蛋白-2抗原AnnexinII膜粘連蛋白-2抗原0.5mgAnnexinII膜粘連蛋白-2抗原
AnnexinV膜粘連蛋白-5(抗原)0.5mgAnnexinV膜粘連蛋白-5(抗原
抗原ANP(atrialnatriureticpeptide)心鈉肽(心鈉素)抗原0.5mgANP(atrialnatriureticpeptide
氨肽酶N抗原ANPEN/CD13(AminopeptidaseN)氨肽酶N抗原0.5mgANPEN/CD13(AminopeptidaseN
Anti-CollagenIIII型膠原(抗原)0.5mgAnti-CollagenIIII型膠原(抗原
抗原Anti-CSP(circumsporozoiteprotein/Plasmodiumyoelii)環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原0.5mgAnti-CSP(circumsporozoiteprotein/Plasmodiumyoelii
注意事項(xiàng):
?1.一般客戶拿到人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B圖片后,應(yīng)該注意什么?
客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。