即用型封堵液 (NC ) 50mL價格磷酸化反應(yīng)(前反應(yīng)):
1. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液:
2. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應(yīng)的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標(biāo)記:
當(dāng)摻入水平很低的時候,需要使用本步驟,即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應(yīng)的標(biāo)記。Sephadex G-50 層析柱(需另購)對于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好,它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5~10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個 堿基的寡核苷酸。
即用型封堵液 (NC ) 50mL價格使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液: 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應(yīng)緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶(10 U/μL) 1 μL 滅菌的超純水 補足到 25 μL 注:5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。 8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第
8 步之后進(jìn)行。
即用型封堵液 (NC ) 50mL價格磷酸化反應(yīng)標(biāo)記:
A. 去磷酸化反應(yīng)
1. 實驗前需自備的試劑:TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)等 2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液: 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl,pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 (CIAP,10~20 U/μL)
2 μL 滅菌的超純水 補足到 150 μL
3. 50℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//(25:24:1),充分混勻。
5. 離心,取上層(水層)移到另一個微量離心管中。
6. 重復(fù)操作 4~5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl(zui終濃度 150 mM)。
8. 加入 375 μL(2.5 倍量)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
9. 離心回收沉淀,用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后,沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
酸性肉湯250g用于酸性缺罐頭食品商業(yè)無菌檢驗
Fraser培養(yǎng)基 Fraser Medium 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)
產(chǎn)芽孢肉湯 Sporulation Broth 250克 產(chǎn)氣莢膜梭菌的產(chǎn)芽孢培養(yǎng)
TBX培養(yǎng)基l用于快速、準(zhǔn)確檢測大腸桿菌大腸桿菌培養(yǎng)24小時,顯蘭色incubationmediaTBX培養(yǎng)基l用于快速、準(zhǔn)確檢測大腸桿菌大腸桿菌培養(yǎng)24小時,顯蘭色
MEIMedium
AcidBorth
LPM瓊脂 LPM Agar 用于單增李氏菌選擇性分離(加入七葉苷和檸檬酸鐵銨)(FDA標(biāo)準(zhǔn))
Hektoen瓊脂培養(yǎng)基 Hektoen Enteric Agar 250克 用于沙門氏菌屬和志賀菌屬的分離培養(yǎng)
細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基250用于快速、準(zhǔn)確檢測細(xì)菌總數(shù),培養(yǎng)24小時,細(xì)菌顯紅色incubationmedia細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基250用于快速、準(zhǔn)確檢測細(xì)菌總數(shù),培養(yǎng)24小時,細(xì)菌顯紅色
腸球菌瓊脂(膽汁七葉苷疊氮鈉瓊脂) 250g 用于食品和水中腸球菌的計數(shù)。
麥芽浸膏湯200g用于酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗
改良緩沖蛋白胨水(MBP) Modified Buffered Peptone Water 用于單增李氏菌前增菌培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))
克氏鐵瓊脂 KIA 100克 腸桿菌科的初步鑒定
O培養(yǎng)基l用于O顯色培養(yǎng)incubationmediaO培養(yǎng)基l用于O顯色培養(yǎng)
BileAesculinAzideAgar
MaltExtractBroth
EB增菌液 用于單增李氏菌選擇性增菌培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))
脫氧膽酸鈉瓊脂 DCLA 250克 大腸菌的平板測定以及腸道菌的選擇性培養(yǎng)
沙門氏菌顯色培養(yǎng)基l用于沙門氏菌的顯色培養(yǎng)incubationmedia沙門氏菌顯色培養(yǎng)基l用于沙門氏菌的顯色培養(yǎng)
6.5%NaCl葡萄糖瓊脂 250g 用于腸球菌高鹽耐受生長試驗
皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)250g加入牛肉粒,用于肉毒梭菌及厭氧梭狀芽孢桿菌的檢驗
UVM培養(yǎng)基 UVM Medium 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK方法)
中國藍(lán)瓊脂 China Blue Lactose Agar 250克 弱選擇性培養(yǎng)基,腸道致病菌選擇分離
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基l用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng)incubationmedia李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基l用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng)
6.5%NaClDextroseAgar
CookedMeatMediumBase
LM-137瓊脂 LM-137 Agar 用于濾膜法單增李氏菌選擇性分離(NEOGEN標(biāo)準(zhǔn))
膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基 DHL Agar 250克 沙門氏菌和志賀氏菌的分離培養(yǎng)
金黃色葡萄球顯色培養(yǎng)基l用于*的顯色培養(yǎng)incubationmedia金黃色葡萄球顯色培養(yǎng)基l用于*的顯色培養(yǎng)
哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)(改良) 250g 用于鏈球菌等苛求菌培養(yǎng)
皰肉牛肉粒加入皰肉基礎(chǔ),配成皰肉培養(yǎng)基
MFB培養(yǎng)基 MFB Medium 用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
*瓊脂 Gentamycin Agar 250克 用于霍亂弧菌的分離培養(yǎng)
霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基l用于霉菌和酵母菌的顯色培養(yǎng)incubationmedia霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基l用于霉菌和酵母菌的顯色培養(yǎng)
乙基紫疊氮鈉肉湯(litsky肉湯) 250g 用于鏈球菌增菌培養(yǎng)
DriedMeatParticle
含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE) Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 用于單增李氏菌增菌培養(yǎng)
MH瓊脂 MHA 250克 抗菌素藥物敏感性試驗
弧菌顯色培養(yǎng)基l用于弧菌的顯色培養(yǎng),副溶血性弧菌顯藍(lán)色,其它弧菌顯無色。incubationmedia弧菌顯色培養(yǎng)基l用于弧菌的顯色培養(yǎng),副溶血性弧菌顯藍(lán)色,其它弧菌顯無色。
疊氮葡萄糖肉湯 250g 用于鏈球菌增菌培養(yǎng)
消毒滅菌效果評價培養(yǎng)基
含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE) Trypticase Soy-Yeast Extract Agar 用于單增李氏菌的分純,培養(yǎng),可用于做7%羊血瓊脂
MH肉湯 MHB 250克 用于抗菌素藥物敏感性試驗
坂崎桿菌顯色培養(yǎng)基l用于坂崎桿菌的顯色培養(yǎng),坂崎桿菌顯藍(lán)色,其它腸桿菌顯無色。incubationmedia坂崎桿菌顯色培養(yǎng)基l用于坂崎桿菌的顯色培養(yǎng),坂崎桿菌顯藍(lán)色,其它腸桿菌顯無色。
草酸鉀兔血漿 0.2ml*20 用于溶血性鏈球菌的檢驗
溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液250g用于壓力蒸氣消毒過程監(jiān)測指示菌(嗜熱脂肪桿菌芽孢)的培養(yǎng)及消毒效果測定
血液瓊脂基礎(chǔ) Blood Agar Base 供分離營養(yǎng)要求較高的致病菌用,后加血液制成血平板
抗生素1號培養(yǎng)基(PH6.5-6.6) Antibiotic Agar 250克 磺卞*等的效價測定
尿道定位顯色培養(yǎng)基l用于分離和鑒別常見尿道致病菌incubationmedia尿道定位顯色培養(yǎng)基l用于分離和鑒別常見尿道致病菌
PotassiumOxalateInRabbitPlasma
即用型封堵液 (NC ) 50mL價格