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dNTP 溶液（標(biāo)記）0.5mL實驗步驟

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公司名稱上海邦景實業(yè)有限公司
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所在地上海市
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
更新時間2017/1/17 16:24:38
訪問次數(shù)563

產(chǎn)品標(biāo)簽:

dNTP 溶液（標(biāo)記）0.5mL

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上海邦景實業(yè)有限公司是一家生物*，主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的、銷售。并代理銷售Omega、Sigma、R&D、GBD、ATCC、HYCLONE IBL Amresco等二十多家國外，致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供*的科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù)，滿足生物化學(xué)、分子生物學(xué) 、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué) ELISA試劑盒等生物科技實驗需求。

公司主營產(chǎn)品：ELISA 試劑盒，ELISA免費(fèi)代測，中國標(biāo)準(zhǔn)品，生化試劑，科研抗體，美國ATCC細(xì)胞株，生物培養(yǎng)基等產(chǎn)品經(jīng)營.

上海邦景實業(yè)有限公司先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒；另有針對各種動物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。

公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù)，力求為我國科研事業(yè)更好的，更專業(yè)的服務(wù)！

公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請退換，有技術(shù)疑問可隨時給于解答，一對一的客服服務(wù)，客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。

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elisa試劑盒，ATCC細(xì)胞，標(biāo)準(zhǔn)品，培養(yǎng)基

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dNTP 溶液（標(biāo)記）0.5mL實驗步驟運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

dNTP 溶液（標(biāo)記）0.5mL實驗步驟產(chǎn)品信息

dNTP 溶液 ( 標(biāo)記 )0.5mL實驗步驟產(chǎn)品介紹：

dNTP 溶液 ( 標(biāo)記 )0.5mL實驗步驟使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑：7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應(yīng)緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶（10 U/μL） 1 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 25 μL 注：5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5～10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做乙醇沉淀時使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
7. 離心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。注：通過第 5～8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP，如要 *將其除去時，乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽提除去蛋白質(zhì)時，請在第
8 步之后進(jìn)行。
dNTP 溶液 ( 標(biāo)記 )0.5mL實驗步驟磷酸化反應(yīng)標(biāo)記：
A. 去磷酸化反應(yīng)
1. 實驗前需自備的試劑：TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）等 2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：成分加入的體積自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl，pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶（CIAP，10~20 U/μL）
2 μL 滅菌的超純水補(bǔ)足到 150 μL
3. 50℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//（25：24：1），充分混勻。
5. 離心，取上層（水層）移到另一個微量離心管中。
6. 重復(fù)操作 4～5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl（zui終濃度 150 mM）。
8. 加入 375 μL（2.5 倍量）的冷無水乙醇，-20℃放置 30～60 分鐘。
9. 離心回收沉淀，用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后，沉淀真空干燥。

10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
dNTP 溶液 ( 標(biāo)記 )0.5mL實驗步驟磷酸化反應(yīng)（前反應(yīng)）：
1. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液：

2. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應(yīng)的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標(biāo)記：
當(dāng)摻入水平很低的時候，需要使用本步驟，即通過體積排阻色譜或過濾試劑盒除去未反應(yīng)的標(biāo)記。Sephadex G-50 層析柱（需另購）對于去除未摻入的 dNTPs 效果很好，它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5～10 分鐘以使 T4 多聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個堿基的寡核苷酸。

馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)250g用于霉菌,酵母菌計數(shù)
衛(wèi)矛醇半固體瓊脂 10(g) incubation media 衛(wèi)矛醇半固體瓊脂 10(g)
西蒙氏枸櫞酸鹽發(fā)酵管西蒙氏枸櫞酸鹽發(fā)酵管 20支 BR
Fraser培養(yǎng)基250用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaFraser培養(yǎng)基250用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標(biāo)準(zhǔn))
DNA酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ) 100 用于彎曲桿菌的DNA酶水解試驗(GB標(biāo)準(zhǔn))
PotatoDextroseAgar
GN增菌液 250(g) incubation media GN增菌液 250(g)
蛋白胨水(*肉湯)發(fā)酵管蛋白胨水(*肉湯)發(fā)酵管 20支 BR
Fraser添加劑5ml*2支添加到HB4用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)incubationmediaFraser添加劑5ml*2支添加到HB4用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
DnaseAgarBasewithMethylGreen
馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基250g用于霉菌的鑒定培養(yǎng)
GN增菌液 1000(g) incubation media GN增菌液 1000(g)
無鹽胰胨水發(fā)酵管無鹽胰胨水發(fā)酵管 20支 BR
UVM培養(yǎng)基250用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaUVM培養(yǎng)基250用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標(biāo)準(zhǔn))
布氏瓊脂 250g 用于彎曲桿菌的抗生素敏感性試驗和純化培養(yǎng)。
PotatoAgarMedium
木糖-賴氨酸-去氧膽酸鹽培養(yǎng)基(XLD) 250(g) incubation media 木糖-賴氨酸-去氧膽酸鹽培養(yǎng)基(XLD) 250(g)
3% NaC1胰胨水發(fā)酵管 3% NaC1胰胨水發(fā)酵管 20支 BR
UVM添加劑*加到HB4用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)incubationmediaUVM添加劑*加到HB4用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
BrucellaAgar
馬鈴薯葡萄糖水250g用于椰毒假單胞酵米面亞種和真菌的增菌培養(yǎng)
40%尿素水 5mL/支×10(g) incubation media 40%尿素水 5mL/支×10(g)
7% NaC1胰胨水發(fā)酵管 7% NaC1胰胨水發(fā)酵管 20支 BR
LM-250用于膜濾法單增李氏菌選擇性分離(NEOGEN標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaLM-250用于膜濾法單增李氏菌選擇性分離(NEOGEN標(biāo)準(zhǔn))
馬尿酸鈉培養(yǎng)基 250g 用于彎曲桿菌的馬尿酸鈉水解試驗(GB標(biāo)準(zhǔn))

dNTP 溶液 ( 標(biāo)記 )0.5mL實驗步驟〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗：黃色至黃綠色結(jié)晶粉末。溶于甲醇、乙醇、乙二醇，微溶于水，其溶液呈略帶紫的藍(lán)色熒光
〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)適用于以閃光燈、氮分子、氬離子、YAG-TH grass、-THX-eCl等為泵浦光源的可調(diào)諧染料激光器。是一種激光轉(zhuǎn)化率較高、穩(wěn)定性好的激光染料，屬藍(lán)綠波段。熒光標(biāo)記試劑，用于痕量檢測酶。
〖保存〗：2～8℃
香豆素
〖英文名稱〗：Coumarin；1,2-Benzopyrone；5,6-Benzo-2-pyrone；cis-o-Coumarinic acid lactone；Coumarinic anhydride；Tonka bean camphor
〖其他名稱〗：香豆內(nèi)酯；1,2-苯并哌哢；氧雜萘鄰?fù)秽徰踺镣?；苯并鄰氧芑酮?,2-苯并吡喃酮；2H-1-苯并吡喃-2-酮
〖CAS號〗：91-64-5
C9H6O2=146.14
-Benzylide