細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠外周血淋巴分離自外周血；所謂的外周血，即除骨髓之外的血液，就是已經(jīng)被造血器官釋放入循環(huán)系統(tǒng)參與循環(huán)的血，它區(qū)別于造血器官內(nèi)的未成熟的血細(xì)胞或未被釋放入循環(huán)的血細(xì)胞。外周血淋巴細(xì)胞（Peripheral Blood Lymphocyte）簡(jiǎn)稱(chēng)PBL，主要是血液循環(huán)中的淋巴細(xì)胞，由T細(xì)胞和B細(xì)胞組成，其中T細(xì)胞（占70%～80%）和B細(xì)胞（占20%～30%）。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血淋巴采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為1×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血淋巴經(jīng)過(guò)檢測(cè)，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來(lái)源 | 外周血 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7625 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 圓形 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠胞漿型0脂酶A2(cPLA2)試劑盒 ，英文名： cPLA2 ELISA Kit
Mouse beta amyloid (A beta 1-42 1-42) ELISA Kit 小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒
ELISA 小鼠Flt3配體(mouse Flt3 Ligand) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforITF(HumanIestinalefoilfactor)ELISAKit人腸三葉因子
通用型丁酰酯酶活性比色法定量試劑盒20次
AIL-R3大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3
兔子白介素9(IL-9)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISAKit ELISA. 96T/48T
T細(xì)胞白血病淋巴瘤蛋白3抗體
小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human P-selectin (omein) ELISA Kit 人網(wǎng)膜素(omein)試劑盒
HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6ELISAKit 人骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCathepsinK,cath-K試劑盒人組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒規(guī)格：96T/48T
轉(zhuǎn)基因油菜(canola)RF3品系試劑盒20次
Humansignalrecognizationpaicleaibody,SRPELISAKit人抗信號(hào)識(shí)別顆?？贵w(SRP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
聚磷酸肌醇磷酸酶5B抗體
CA14重組人 Carbonic Anhydrase XIV / CA14 蛋白 Protein
血管緊張素Ⅱ受體2(AGTR2)重組蛋白 Recombinant Angiotensin II Receptor 2 (AGTR2)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
GP1BB Protein Human 重組人 GP1BB / CD42c 蛋白
Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標(biāo)簽)
小鼠外周血淋巴細(xì)胞血管緊張素Ⅱ受體2(AGTR2)重組蛋白 Recombinant Angiotensin II Receptor 2 (AGTR2)
GP1BB Protein Human 重組人 GP1BB / CD42c 蛋白
CA14重組人 Carbonic Anhydrase XIV / CA14 蛋白 Protein
Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 標(biāo)簽)
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取
