細胞傳代步驟：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介：
兔嗅球分離自嗅球組織；嗅球是脊椎動物前腦結(jié)構(gòu)中參與嗅覺的部分，用于感知氣味。嗅球分為二個不同的結(jié)構(gòu)：主嗅球及輔助嗅球。在大腦額葉來自許多嗅細胞的神經(jīng)纖維纏集在一起，形成線球狀的部分。在這里，纖維與多個次級神經(jīng)元——僧帽細胞的樹突相連接，進而由這里伸出神經(jīng)纖維形成嗅囊，終止于額葉下方。一般認為它在嗅味的辨別中具有重要的功能。對于大部份的脊椎動物而言，嗅球位在大腦的前面，不過人的嗅球位于大腦的內(nèi)部。嗅球由篩骨的篩板固定且保護嗅球，哺乳動物的篩板會分隔嗅球和嗅上皮，而嗅神經(jīng)會穿過篩板中的篩孔而連接到嗅球。嗅球分為二個不同的結(jié)構(gòu)：主嗅球及輔助嗅球。
方法簡介：
實驗室分離的兔嗅球采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔嗅球經(jīng)MAP-2免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 嗅球 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8461 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 神經(jīng)元細胞樣 |
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2天半量換液1次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：神經(jīng)元細胞樣
傳代特性：不傳代，不增殖，存活1-2周
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔嗅球體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒
Rat angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 大鼠血管生成素2(ANG-2)試劑盒
HumanAi-mitochondriaaoaibodies,AMAELISAKit 人抗線粒體抗體(AMA)試劑盒分裝
Humancytotoxin,CTX試劑盒人細胞毒素(CTX)試劑盒
組織IKKα激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanplasminogenactivator，PLGAELISAKit人纖溶酶原激活劑(PLGA)試劑盒
中文名稱 方法 規(guī)格
人抗糖蛋白抗體(GP)ELISAKit ELISA.
人抗單核細胞抗體(AMA)ELISAKit ELISA.
人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISAKit ELISA.
顆粒酶A抗體
p53結(jié)合蛋白3抗體
SERPINF2重組小鼠 SerpinF2 蛋白 (His 標簽) Protein
CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4 0.5mlCDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依賴性激酶4(抗原)
HOXA1重組人 HOXA1 蛋白 (His 標簽) Protein
AKR1B1 Protein Human 重組人 AKR1B1 蛋白 (His 標簽)
SFRP4 Protein Mouse 重組小鼠 sFRP4 蛋白 (His 標簽)
CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4 0.5mlCDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依賴性激酶4(抗原)
AKR1B1 Protein Human 重組人 AKR1B1 蛋白 (His 標簽)
SERPINF2重組小鼠 SerpinF2 蛋白 (His 標簽) Protein
SFRP4 Protein Mouse 重組小鼠 sFRP4 蛋白 (His 標簽)
HOXA1重組人 HOXA1 蛋白 (His 標簽) Protein
兔嗅球細胞豬白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒
Human ai IVIgG aibody ELISA Kit 人抗IVIgG抗體試劑盒
Porcineiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit 豬細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒分裝
CLIAKitforALB(Humanmicroalbunminuria)ELISAKit人尿微量白蛋白
血液(UROKINASE)活性熒光定量試劑盒20次
MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1/Flt1ELISAKit小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)試劑盒
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取
