乙型腦炎病毒抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

使  用  說  明（96T/48T）

[原理]

流行性乙型腦炎是由嗜神經(jīng)的乙腦病毒所致的中樞神經(jīng)系統(tǒng)性傳染病。經(jīng)蚊等吸血昆蟲傳播，流行于夏秋季，多發(fā)生于兒童，臨床上以高熱、意識障礙、驚厥、呼吸衰竭及腦膜刺激征為特征。部分患者留有嚴(yán)重后遺癥，重癥患者病死率較高。

本試劑盒采用間接ELISA法，以純化流行性乙型腦炎病毒抗原包被，配以抗人IgM單克隆抗體酶結(jié)合物等試劑組成。本試劑盒操作快速、簡便，取微量全血即可檢測，適用于計劃免疫效果監(jiān)測和人群抗體水平調(diào)查。

[試劑盒組成]

1、化EEB抗原預(yù)包被板  1塊（8X12/4X12）

2、陰性對照                  1瓶

3、陽性對照                  1瓶

4、標(biāo)本稀釋液           1瓶（22/11 ml，直接使用）

5、酶結(jié)合物             1瓶（12/5ml，直接使用）

6、30X濃縮洗液              

1瓶（20/10ml，加蒸餾水1：30稀釋使用）

7、顯示劑A、B液            各1瓶（5/3ml）

8、終止液（2M H₂SO₄）       1瓶（5/3ml）

9、說明書                    1份

[操作步驟]

1、樣本稀釋：用標(biāo)本稀釋液以1：41（5ul—200ul）稀釋標(biāo)本，混勻后置37℃20分鐘。

2、加樣：小心吸取已稀釋待檢標(biāo)本上清液100ul于反應(yīng)孔中，設(shè)陰、陽性對照（各100ul）及空白對照（加100ul標(biāo)本稀釋液）各一孔。輕拍混勻。37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液洗板3次并在吸水紙上拍干。

3、加酶結(jié)合物：每孔2滴，混勻后置37℃溫育30分鐘。同上法洗滌3次并拍干。

4、 顯色：每孔加顯色劑A、B各一滴，輕拍混勻（或震蕩器混勻）后置37℃10分鐘。

[結(jié)果判斷]

1. 目測：在白色背景下觀察各孔顯色情況，蘭色者為陽性，無色者為陰性。

2. 酶標(biāo)儀測定：每孔加終止液1滴（或50ul），混勻后在450nm下測定各孔O.D值。

S/N=標(biāo)本O.D值/ 陰性對照O.D值。        

S/N≥2.1為陽性；

1.5≤S/N<2.1為可疑標(biāo)本; S/N<1.5為陰性。

④ 陰性對照(NC)小于0.10時以0.10計, 大于0.1小于0.21時以實際O.D值計算;若大于0.21時,實驗可能出現(xiàn)了較大誤差,需重復(fù)實驗。

⑤ 陽性對照(PC)值通?！?/span>0.4,實驗成立,否則需重做。

[注意事項]

1. 微孔板須密封防潮，從冷藏環(huán)境中取出時，應(yīng)置室溫平衡至潮氣盡干后方可開啟使用，余者封存置2-8℃。

2. 滴加試劑前應(yīng)將液體翻轉(zhuǎn)數(shù)次混勻，滴加時保持瓶身垂直。

3. 洗滌時每孔均須加滿，防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。

4. 試劑置2-8℃存放，不能凍結(jié)，有效期10個月。

5. 避免用溶血、混濁或脂血標(biāo)本。

6. 好用新鮮標(biāo)本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小時或-20℃凍存4周（樣本應(yīng)避光）。