土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)試劑盒-分光光度法正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
土壤芳基硫酸酯酶來(lái)自于土壤微生物，能酶促土壤有機(jī)硫化物轉(zhuǎn)化為植物可吸收的無(wú)機(jī)態(tài)硫，在硫素的生物化學(xué)循環(huán)和植物的硫營(yíng)養(yǎng)代謝中具有重要的作用，是反映土壤質(zhì)量的一個(gè)重要生物學(xué)指標(biāo)。
測(cè)定原理：
S-ASF 能夠催化對(duì)-硝基苯硫酸鉀生成對(duì)-硝基苯/酚，后者在 410nm 有特征光吸收。
自備用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。
土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)試劑盒-分光光度法試劑組成和配制：
試劑一：甲苯 5mL×1 瓶，4℃保存（自備）；試劑二：液體 20mL×1 瓶，4℃保存；
試劑三：粉劑×2 支，-20℃保存；臨用前加入 1.25mL 蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑仍-20℃保存;
試劑四：液體 5mL×1 瓶，4℃保存； 試劑五：液體 20mL×1 瓶，4℃保存；
樣品處理
新鮮土樣自然風(fēng)干或 37 度烘箱風(fēng)干，過(guò) 30~50 目篩。
土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)試劑盒-分光光度法步驟：
試劑名稱 | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 |
風(fēng)干土樣（g） | 0.1 | 0.1 |
試劑一（μL） | 25 | 25 |
振蕩混勻，使土樣全部濕潤(rùn)，室溫放置 15min
試劑二（μL） | 400 | 400 |
試劑三（μL） | 100 | |
蒸餾水（μL） | 100 |
混勻， 37℃水浴 1h 后
試劑四（μL） | 100 | 100 |
試劑五（μL） | 400 | 400 |
充分混勻，室溫靜置 2min 后，10000g 25℃離心 10min，取 800μL 上清液于 410nm 處測(cè)定吸光值 A，計(jì)算 ΔA=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)試劑盒-分光光度法活力計(jì)算：
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為 y = 0.0066x -0.013；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/L），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1 μmol 對(duì)-硝基苯/酚定義為一個(gè)酶活力單位。
S-ASF 活力（μmol/d /g 土樣）＝ (ΔA+0.013) ÷0.0066×V 反總÷W÷T =19.09×(ΔA+0.013)
T：反應(yīng)時(shí)間，1h=1/24d； V 反總：反應(yīng)體系總體積：5.25×10-4 L；W：樣本質(zhì)量，0.1g。
