土壤木質(zhì)素過氧化物酶(S-LiP)試劑盒-微量法注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
木質(zhì)素過氧化物酶(EC1.11.1.14)是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶,屬于木質(zhì)素降解酶系, 在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應用潛力。
土壤木質(zhì)素過氧化物酶(S-LiP)試劑盒-微量法測定原理
木質(zhì)素過氧化物酶氧化藜蘆醇生成藜蘆醛,在 310nm 處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)。
試劑組成和配制
試劑一:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 15mL×1 瓶,4℃避光保存。試劑三:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
土壤木質(zhì)素過氧化物酶(S-LiP)試劑盒-微量法樣品處理
新鮮土樣風干,過 30-50 目篩。
測定操作
對照管 | 測定管 | |
土樣(g) | 0.04 | 0.04 |
甲苯(μL) | 30 | 30 |
25℃靜置 15min | ||
試劑一(μL) | 200 | |
蒸餾水(μL) | 200 | |
試劑二(μL) | 120 | 120 |
試劑三(μL) | 80 | 80 |
30℃震蕩反應 3h,冰浴 5min,12000g,4℃離心 10min,取上清 200μL,于微量石英比色皿 /96 孔板(UV)板,測定 310nm 處吸光值,分別記為 A 對照和 A 測定,△A=A 測定- A 對照 |