土壤有效硼試劑盒-可見(jiàn)分光光度法注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義
土壤中有效硼直接影響著植物的吸收和利用。
測(cè)定原理
硼與甲亞胺在弱酸條件下形成棕黃色配合物，在420nm有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、常溫離心機(jī)、震蕩儀、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿。
土壤有效硼試劑盒-可見(jiàn)分光光度法試劑組成和配制
試劑一：液體 1mL×1 支，4℃保存。
試劑二：液體 20mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加 10mL 蒸餾水溶解。
樣本處理
新鮮土樣風(fēng)干，過(guò)100目篩，按照土壤質(zhì)量（g）：蒸餾水體積（mL）為1：2的比例（建議稱(chēng)取約0.5g土樣，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水，沸水中浸提10min，待自然冷卻，加入50μL試劑一，震蕩5min，8000g ，25℃離心10min，取上清液待測(cè)。
土壤有效硼試劑盒-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定操作表
空白管 | 測(cè)定管 | |
樣本（μL） | 200 | |
試劑二（μL） | 400 | 400 |
試劑三（μL） | 200 | 200 |
H 2 O（μL） | 400 | 200 |
充分混勻，25℃黑暗中靜置 1h | ||
于1mL玻璃比色皿，蒸餾水調(diào)零，測(cè)定420nm處吸光值A(chǔ)，分別記為A空白管和A測(cè)定管， △A=A 測(cè)定管-A 空白管 | ||
土壤有效硼試劑盒-可見(jiàn)分光光度法計(jì)算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.3897x-0.2359，R2=0.9995
全鐵含量（mg/kg）=（△A+0.2359）÷0.3897×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）
= 51.32×（△A+0.2359）÷W
V 反總：反應(yīng)總體積，1mL；V 樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.2mL；V 樣總：加入提取液體積，4mL，W：樣本質(zhì)量，g
注意事項(xiàng)
1. 配制好的試劑二 4℃保存不可超過(guò) 7 天。
2. 顯色時(shí)嚴(yán)格控制溫度并且避光，以免顯色劑見(jiàn)光分解。
