土壤亞硝酸還原酶試劑盒-可見分光光度法注意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
規(guī)格: 50 管/24 樣
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體10mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。 （臨用前加10mL蒸餾水充分溶解）
試劑三：液體10mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體25mL×1瓶，4℃避光保存。 （使用前50℃加熱溶解）
試劑五：液體25mL×1瓶，4℃保存。
土壤亞硝酸還原酶試劑盒-可見分光光度法產(chǎn)品說明：
土壤亞硝酸還原酶是反硝化作用中的關(guān)鍵酶之一，參與亞硝酸鹽至NO的還原反應(yīng)，它的活性反
映了生物降解過程中氮素的轉(zhuǎn)化效率，為氮素轉(zhuǎn)化規(guī)律的研究提供一定的依據(jù)。
亞硝酸還原酶可將NO2- 還原為NO ，使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2- 減少
，即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)土壤中亞硝酸還原酶的活性。
自備實驗用品及儀器：
天平、可見分光光度計、水浴鍋、低溫離心機、1mL玻璃比色皿。
土壤亞硝酸還原酶試劑盒-可見分光光度法測定操作：
空白管 | 對照管 | 測定管 | 無底物管 | |
風(fēng)干土樣（g） | 0.1 | 0.1 | ||
蒸餾水（μL） | 200 | 200 | ||
試劑一（μL） | 200 | 200 | ||
試劑二（μL） | 200 | 200 | 200 | 200 |
混勻后，25℃反應(yīng)1h | ||||
試劑三（μL） | 200 | 200 | 200 | 200 |
充分震蕩30s ，1000rpm ，4℃ ，離心10min | ||||
上清液（μL） | 500 | 500 | 500 | 500 |
試劑四（μL） | 500 | 500 | 500 | 500 |
試劑五（μL） | 500 | 500 | 500 | 500 |
充分混勻，室溫靜置顯色 10min ，用蒸餾水調(diào)零，于 1mL 玻璃比色皿中測定 540nm 各管 吸光值（參照注意事項二） ，分別記為 A 空白管、A 對照管、A 測定管、A 無底物管。A 空白管和A 無底物管只需各做一管。 | ||||
酶活單位定義： 每g土樣每24h還原1μmol NO2ˉ的量為一個酶活力單位。
S-NiR（μmol /d/g干重） =底物消耗量（ μmol）÷W÷T
=C標準×[(A空白管-A 無底物管)-(A測定管-A對照管)]÷(A空白管-A無底物管)×V加樣÷W÷T C標準： 標準品濃度為72.5μmol /ml；V加樣： 反應(yīng)體系加入樣本的體積，0.2mL；T：反應(yīng)時間， 1h=1/24d； W：樣本質(zhì)量，g。
土壤亞硝酸還原酶試劑盒-可見分光光度法注意事項：
1. 配制好的試劑二需 3天內(nèi)使用完。
2. 若吸光值超過2 ，將上清液用蒸餾水（無亞硝酸鹽污染） 進行適當?shù)南♂尯笤偌尤牍ぷ饕猴@色， 并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
