FDA水解酶試劑盒-微量法注意：正式測定前務必取2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
產(chǎn)品內容：
標準液：液體4mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體40mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑1瓶，-20℃避光保存，臨用前加4mL試劑三溶解。
試劑三：液體40mL×1瓶，4℃保存。
FDA水解酶試劑盒-微量法產(chǎn)品說明：
FDA水解反應能很好的反應土壤中微生物活性和土壤質量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機質的轉化，是土壤質量研究中的重要生物學指標之一。
FDA是一種無色化合物，在介質中能被許多土壤酶所催化水解，并經(jīng)脫水反應，產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素，穩(wěn)定不易被分解，并在490nm處有強吸收峰，通過檢測490nm處的吸光值變化可計算得FDA水解酶活性。
需自備的儀器和用品：
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
FDA水解酶試劑盒-微量法操作步驟：
一、樣本處理
稱取風干過20目篩土壤約0.05g，備用。
二、測定操作表
空白管 | 標準管 | 對照管 | 測定管 | |
樣本（g） | 0.05 | 0.05 | ||
標準液（μL） | 40 | |||
雙蒸水（μL） | 40 | |||
試劑一（μL） | 200 | 200 | 240 | 200 |
試劑二（μL） | 40 | |||
充分混勻，30℃，震蕩1h | ||||
試劑三（μL） | 160 | 160 | 160 | 160 |
10000g，25℃，離心5min，取200μL上清于微量石英比色皿/96孔板中測定490nm處吸光值A，△A1=A標準管-A空白管，△A2=A測定管-A對照管 | ||||
注意：空白管和標準管只需測定一次。
三、酶活性計算公式
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
酶活性定義：每克土壤每天產(chǎn)生1μmol熒光素的量為一個酶活力單位。
FDA活性（μmol/d/g）=（△A2÷△A1×C標準品）×V反總÷W
= 2.4×（△A2÷△A1）÷W
b.用96孔板測定的計算公式如下
酶活性定義：每克土壤每天產(chǎn)生1μmol熒光素的量為一個酶活力單位。
FDA活性（μmol/d/g）=（△A2÷△A1×C標準品）×V反總÷W
= 2.4×（△A2÷△A1）÷W
C標準品：標準品濃度100μmol/L；V反總：反應總體積，0.4mL；W：樣本質量，g
FDA水解酶試劑盒-微量法注意事項：
1.盡量采用新鮮土樣或者短期低溫保存樣品，否則很難準確反映酶的活性。
2.測定之前進行預實驗，若吸光值較高，請進行適當?shù)南♂屧贉y定，并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
