土壤酸性蛋白酶試劑盒-可見分光光度法產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入10mL 蒸餾水充分溶解待用;
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入100uL 試劑七使粉劑潤濕,然后加入20mL 試劑一, 轉(zhuǎn)入燒杯中沸水浴磁力攪拌溶解后待用;
試劑四:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入50mL 蒸餾水充分溶解待用; 試劑五:液體10mL×1 瓶,4℃保存;
試劑六:液體1.5mL×1 支,0.05mg/mL 標準酪氨suan溶液,4℃保存; 試劑七:液體1.5mL×1 支,4℃保存;
土壤酸性蛋白酶試劑盒-可見分光光度法產(chǎn)品說明:
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機化合物的轉(zhuǎn)化,其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-ACPT 在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解,與土壤有機質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關。
酸性條件下,S-ACPT 可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨suan;在堿性條件下,酪氨suan還原磷鉬酸化合物生成鎢藍;在680nm 有特征吸收峰。
所需儀器及設備:
可見分光光度計、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水。操作步驟:
土壤酸性蛋白酶試劑盒-可見分光光度法一、測定操作:
1、分光光度計預熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長至680nm,蒸餾水調(diào)零。
2、試劑二、三和四 40℃水浴 10min。
3、樣本測定:
試劑名稱 | 測定管 | 對照管 |
風干土樣(g) | 0.02 | 0.02 |
試劑一(μL) | 100 | 300 |
試劑三(μL) | 200 |
混勻,40℃水浴 30min,振蕩 5-6 次,使土樣與反應液充分接觸
試劑二(μL) | 100 | 100 |
混勻,10000rpm 室溫離心 10min,取上清液
測定管 | 對照管 | 標準管 | |
上清液(μL) | 150 | 150 | |
試劑六(μL) | 150 | ||
試劑四(μL) | 700 | 700 | 700 |
試劑五(μL) | 150 | 150 | 150 |
混勻,40℃水浴 20min,680nm 下讀取各管吸光值 A
注意:標準管只需測一次。每個測定管設一個對照管。
土壤酸性蛋白酶試劑盒-可見分光光度法S-ACPT 活性計算:
單位定義:每天每g 土樣中產(chǎn)生1mg 酪氨suan為一個S-ACPT 活力單位。
S-ACPT(U/g)=C 標準×(A 測定管-A 對照管)÷A 標準管×V 反總÷W÷T=48×(A 測定管-A 對照管)÷A 標準管
C 標準管:標準管濃度,0.05mg/mL;V 反總:反應體系總體積,0.4mL;T:反應時間,30min=1/48d;
W:樣本質(zhì)量,0.02g。