土壤酸性蛋白酶試劑盒-微量法規(guī)格:100管/48樣
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體30mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入5mL 蒸餾水充分溶解待用；
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入50uL 試劑七使粉劑潤(rùn)濕，然后加入10mL 試劑一， 轉(zhuǎn)入燒杯中沸水浴磁力攪拌溶解后待用；
試劑四：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入50mL 蒸餾水充分溶解待用；
試劑五：液體3mL×1 瓶，4℃保存；
試劑六：液體1.5mL×1 支，0.05mg/mL 標(biāo)準(zhǔn)酪氨suan溶液，4℃保存； 試劑七：液體1.5mL×1 支，4℃保存；
土壤酸性蛋白酶試劑盒-微量法產(chǎn)品說(shuō)明：
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化，其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-ACPT 在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解，與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。
酸性條件下，S-ACPT 可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨suan；在堿性條件下，酪氨suan還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)；在680nm 有特征吸收峰。
所需儀器及設(shè)備：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、雙蒸水。
土壤酸性蛋白酶試劑盒-微量法操作步驟：
一、測(cè)定操作：
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至680nm，蒸餾水調(diào)零。
2、試劑二、三和四 40℃水浴 10min。
3、樣本測(cè)定：
試劑名稱 | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 |
風(fēng)干土樣（g） | 0.01 | 0.01 |
試劑一（μL） | 50 | 150 |
試劑三（μL） | 100 |
混勻，40℃水浴 30min，振蕩 5-6 次，使土樣與反應(yīng)液充分接觸
試劑二（μL） | 100 | 100 |
混勻，8000rpm 25℃離心 10min，取上清液，在EP 管或 96 孔板中加入下列試劑
測(cè)定管 | 對(duì)照管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | |
上清液（μL） | 30 | 30 | |
試劑六（μL） | 30 | ||
試劑四（μL） | 140 | 140 | 140 |
試劑五（μL） | 30 | 30 | 30 |
混勻，40℃水浴 20min，680nm 下讀取各管吸光值 A
注意：標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)一次。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
土壤酸性蛋白酶試劑盒-微量法S-ACPT 活性計(jì)算：
單位定義：每天每g 土樣中產(chǎn)生1mg 酪氨suan為一個(gè)S-ACPT 活力單位。
S-ACPT(U/g)=C 標(biāo)準(zhǔn)×(A 測(cè)定管-A 對(duì)照管)÷A 標(biāo)準(zhǔn)管×V 反總÷W÷T=48×(A 測(cè)定管-A 對(duì)照管)÷A 標(biāo)準(zhǔn)管
C 標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.05mg/mL；V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.2mL；T：反應(yīng)時(shí)間，30min=1/48d；
W：樣本質(zhì)量，0.01g。
