商品介紹:
測(cè)定意義
ACP是一種在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解的酶。該酶主要用于酒精發(fā)酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。
測(cè)定原理:
酸性條件下,ACP催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨;在堿性條件下,酪氨還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán);鎢藍(lán)在680nm有特征吸收峰,通過測(cè)定其吸光度增加,來計(jì)算ACP活性。
自備儀器和樣品:
水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、0.5 mL EP管和蒸餾水。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
酸性蛋白酶檢測(cè)試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/48樣 | FS-01S63507 |
產(chǎn)品內(nèi)容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時(shí)加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時(shí)加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
NADH 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提?。?/span>
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提?。悍Q取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提?。悍Q取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
3、細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提取:收集 500 萬細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提?。菏占?500 萬細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、公司產(chǎn)品僅用于科研操作過程應(yīng)避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應(yīng)過程要注意避光。
3、當(dāng)吸光值大于 1 時(shí),建議稀釋后測(cè)量,計(jì)算公式中應(yīng)當(dāng)乘以稀釋倍數(shù)。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
豬BCL2修飾因子(BMF)試劑盒Human ZNF571 ELISA Kit富含亮跨膜纖連蛋白1抗體
豬垂草扁桃(VMA)試劑盒 Human ZNF346 ELISA Kit富含亮跨膜纖連蛋白2抗體
豬性結(jié)合球蛋白(SHBG)試劑盒Human ZNF34 ELISA Kit富含亮跨膜纖連蛋白3抗體
豬組織轉(zhuǎn)谷酰(TGM2)試劑盒Human ZNF446 ELISA Kit牛纖維蛋白原抗體
豬G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)試劑盒Human RBP1(Retinol-binding protein 1) ELISA KitFAM172A蛋白抗體
豬原纖維蛋白2(FBN2)試劑盒Human ZNF557 ELISA Kit磷化粘著斑激抗體
豬封閉蛋白14(CLDN14)試劑盒 Human ZNF35 ELISA Kit磷化粘著斑激抗體
豬血管生成樣蛋白4(ANGPTL4)試劑盒 Human ZNF593 ELISA Kit磷化脆性組三聯(lián)體抗體
豬菌性/通透性增加蛋白(BPI)試劑盒 Human ZNF571 ELISA Kit磷化FRA-1蛋白抗體
豬球蛋白E(IgE)試劑盒Human ZNF460 ELISA Kit磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體
豬外基質(zhì)蛋白1(ECM1)試劑盒Human ZNF470 ELISA Kit磷化性成纖維生長(zhǎng)因子受體1抗體
豬甘露聚糖結(jié)合凝集相關(guān)絲蛋白2(MASP2)試劑盒Human ZNF48 ELISA Kit磷化叉頭蛋白家族抗體
豬白介15(IL-15)試劑盒Human ZNF486 ELISA Kit磷化叉頭蛋白3A抗體
豬脂蛋白a(LP-a)試劑盒Human ZNF483 ELISA Kit磷化叉頭蛋白3A抗體
豬干因子受體(SCFR/c-Kit)試劑盒Human ZNF488 ELISA Kit磷化叉頭蛋白3A抗體
酸性蛋白酶檢測(cè)試劑盒微量法乙二乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)衣康 AR,99.8%Anti-IL-1 Beta/FITC 熒光標(biāo)記白介1β抗體IgG
乙二丁 GCS, ≥99.5% (GC)曲 99%Anti-IL-1ra/FITC 熒光標(biāo)記白介-1受體拮抗劑抗體IgG
曙紅Y(水溶) AR,80%乙基環(huán)己烷 99%Anti-IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、豬、牛、羊、犬白介-1受體拮抗劑抗體IgG
EDTA二鈉鈷 AR甲基環(huán)己烷 99%Anti-IL-1R I /FITC 熒光標(biāo)記白介1受體Ⅰ抗體IgG
乙二四乙鐵鈉 植物培養(yǎng)級(jí)氟化,二水 CPAnti-IL-1R II /FITC 熒光標(biāo)記白介1受體Ⅱ抗體IgG
氟羅里硅土 60-100 目氟化,無水 AR,粉末Anti-IL1RAPL1 /FITC 熒光標(biāo)記白介受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白抗體IgG
三十六烷 AR,96%氟化,無水 GR,粉末Anti-IL-2/FITC 熒光標(biāo)記白介2抗體IgG
三十六烷 Standard for GC, ≥98% (GC)鈀粉 99.9% metals basis,粒徑0.5μmAnti-IL-2/FITC 熒光標(biāo)記白介2抗體(人) IgG