產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
MDHm線粒體蘋果酸脫氫酶檢測試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | FS-01S63471 |
商品介紹：
測定意義
MDH （EC 1.1.1.37）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物， 連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性，MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH，細菌中通常只含有NAD-MDH，在真核細胞中，NAD-MDH分布于細胞質(zhì)和線粒體中。
測定原理：
MDHm催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸，導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
產(chǎn)品內(nèi)容：
公司產(chǎn)品僅用于科研酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；
堿性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 1.5mL×1 支，4℃保存
試劑三：粉劑×1 支，-20℃保存，用時加入 1.6mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；
試劑四：粉劑×1 支，4 ℃保存，用時加入 1.9mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；
試劑五：液體 0.7mL×1 支，4 ℃保存；
試劑六：液體 10mL×1 瓶，4 ℃保存；
試劑七：自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。
NADH 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。
操作步驟：
一、NAD+和 NADH 的提取：
1、血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提?。喝?0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min；取上清 200uL，加入等體積堿性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清，冰上保存待測。
NADH 的提?。喝?0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 堿性提取液，煮沸 5min(蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提?。悍Q取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積堿性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。
NADH 的提?。悍Q取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 堿性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。
3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提?。菏占?500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。
NADH 的提?。菏占?500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 堿性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
甲狀腺(T4)試劑盒Anti-MIA Antibody魚類促性腺釋放
降鈣原(PCT)試劑盒 Anti-MID1 Antibody兔骨保護
血小板生成(TPO)試劑盒Anti-MINK1 Antibody小鼠小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3
血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)試劑盒Anti-MINK1 Antibodyβ
血管內(nèi)皮生長因子D(VEGF-D)試劑盒Anti-MINPP1 Antibody大鼠胞漿型磷脂A2
血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/KDR)試劑盒Anti-MINPP1 Antibodyα
胰島(INS)試劑盒 Anti-MKI67 Antibody魚類狀腺原
球蛋白G1(IgG1)試劑盒Anti-MKI67 Antibody兔胰淀
球蛋白G2(IgG2)試劑盒Anti-MKNK2 Antibody小鼠小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2
球蛋白G3(IgG3)試劑盒Anti-MKNK1 Antibody大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽
球蛋白G4(IgG4)試劑盒Anti-MKNK1 Antibody大鼠肌鈣蛋白T
球蛋白M(IgM)試劑盒 Anti-MLF1 Antibody兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ
熱休克蛋白20(HSPβ6/HSP-20)試劑盒 Anti-MLST8 Antibody小鼠小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1
熱休克蛋白27(HSP-27/HSPB1)試劑盒 Anti-MLANA AntibodyCC趨化因子受體1
熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒 Anti-MLNR Antibody魚類皮質(zhì)
MDHm線粒體蘋果酸脫氫酶檢測試劑盒微量法乙正己酯 分析標準品,≥99.5% (GC) 椰子 98%, FCC, KosherAnti-E2F5 轉(zhuǎn)錄因子E2F-5抗體
葉酯 97%橙花 97%Anti-E2F6 轉(zhuǎn)錄因子E2F6抗體
柳己酯 98%乙位萘乙 99%Anti-E2 tag E2 tag標簽抗體
己異戊酯 98%乙位萘乙 食品級,KosherAnti-HPV16 E7 protein 人瘤病16型E7抗體
異戊異戊酯 98%反,反-2,4-壬二烯 >85.0%(GC)Anti-EAAT1/Glast 膠質(zhì)谷運載蛋白1抗體
異丁 standard for GC, ≥99.5% (GC)正壬 96%Anti-EAAT2 膠質(zhì)谷運載蛋白2抗體
異丁 ≥99%, FCC正壬 ≥95%, FCC, Kosher, FGAnti-EAAT3 膠質(zhì)谷運載蛋白3抗體
異戊 98%3,6-壬二烯 97%Anti-EBNA 3A EB病核抗原-3A抗體
注意事項：
1、操作過程應(yīng)避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加，必須分開加。
2、反應(yīng)過程要注意避光。
3、當吸光值大于 1 時，建議稀釋后測量，計算公式中應(yīng)當乘以稀釋倍數(shù)。
