冷凍保存細胞之方法:
人臍靜脈內(nèi)皮細胞系;HUVEC-T/T價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品描述:
細胞名稱 人臍靜脈內(nèi)皮細胞系;HUVEC-T/T價格
形態(tài)特性上皮樣
生長特性貼壁生長
特征特性該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況C5
凍存條件基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)人臍靜脈內(nèi)皮細胞系;HUVEC-T/T價格準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
?1.一般客戶拿到人臍靜脈內(nèi)皮細胞系;HUVEC-T/T價格后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
iNOS*兔誘導型一氧化氮合成酶規(guī)格48T/96T
OSM*兔抑瘤素M規(guī)格48T/96T
AChRab*兔乙酰膽堿受體抗體規(guī)格48T/96T
ACh*兔乙酰膽堿規(guī)格48T/96T
NOS*兔一氧化氮合成酶規(guī)格48T/96T
OLAb*兔氧化低密度脂蛋白抗體規(guī)格48T/96T
Fbg*兔血纖蛋白原規(guī)格48T/96T
TXB2*兔血栓素B2規(guī)格48T/96T
CH50*兔血清總補體規(guī)格48T/96T
NO*兔血清一氧化氮規(guī)格48T/96T
人臍靜脈內(nèi)皮細胞系;HUVEC-T/T價格白介素13抗原IL-13(Interleukin-13)白介素13抗原0.5mgIL-13(Interleukin-13
IL-14/Taxilinalpha白介素14抗原IL-14/Taxilinalpha白介素14抗原0.5mgIL-14/Taxilinalpha白介素14抗原
白細胞介素-15抗原IL-15(Interleukin-15)白細胞介素-15抗原0.5mgIL-15(Interleukin-15
白介素16抗原IL-16(Interleukin-16)白介素16抗原0.5mgIL-16(Interleukin-16
白細胞介素-16抗原IL-16/LCF(interleukin-16)(LymphocyteChemotacticFactor)白細胞介素-16抗原0.5mgIL-16/LCF(interleukin-16
IL-17(Interleukin-17)human白介素-17抗原(人)0.5mgIL-17(Interleukin-17
白介素-17抗原IL-17(Interleukin-17)白介素-17抗原0.5mgIL-17(Interleukin-17
白細胞介素-18/干擾素γ誘導因子IL-18/IGIF(Interleukin-18)白細胞介素-18/干擾素γ誘導因子0.5mgIL-18/IGIF(Interleukin-18
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