產(chǎn)品內(nèi)容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時(shí)加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時(shí)加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
NADH 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
NADMDHNAD蘋(píng)果酸脫氫酶檢測(cè)試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | FS-01S63216 |
商品介紹:
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋(píng)果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋(píng)果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋(píng)果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH,在真核細(xì)胞中,NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。
測(cè)定原理:
NAD-MDH催化NADH還原草酰乙酸生成蘋(píng)果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
注意事項(xiàng):
1、公司產(chǎn)品僅用于科研操作過(guò)程應(yīng)避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開(kāi)加。
2、反應(yīng)過(guò)程要注意避光。
3、當(dāng)吸光值大于 1 時(shí),建議稀釋后測(cè)量,計(jì)算公式中應(yīng)當(dāng)乘以稀釋倍數(shù)。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提?。悍Q取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
3、細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提?。菏占?500 萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提?。菏占?500 萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
Toll樣受體9(TLR-9/CD289)檢測(cè)試劑盒白芷屬腦苯 無(wú)水級(jí), 99.8%乙乙酯 AR,99%
Toll樣受體9(TLR-9/CD289)檢測(cè)試劑盒百兩金素A乙叔丁 分析標(biāo)準(zhǔn)品乙乙酯 for HPLC, >99.0%(GC)
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)檢測(cè)試劑盒 百秋李4-叔丁吡啶 98%溶液 AR,含10-15% 穩(wěn)定劑
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)檢測(cè)試劑盒 百蕊草素I鄰苯二丁芐酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品 Standard for GC,>99.9%
單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)檢測(cè)試劑盒 半邊旗4F苯 Standard for GC,≥99.5%(GC) AR,99.5%
單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)檢測(cè)試劑盒 半邊旗5F聚氧乙烯月桂 高純級(jí),Brij-35 CP,99.5%
白三烯D4(LTD4)檢測(cè)試劑盒半齒澤蘭素2-溴乙 分析標(biāo)準(zhǔn)品 AR,無(wú)水級(jí)
白三烯D4(LTD4)檢測(cè)試劑盒半枝蓮2-溴-5-氟吡啶 99% for HPLC, ≥99.9%
N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)檢測(cè)試劑盒 胞苷溴代硝烷 90% 農(nóng)殘級(jí), ≥99.9%
N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)檢測(cè)試劑盒 胞嘧啶雙(4-)磷酯 99% ≥99.9%(GC)
紅激因子(ESF)檢測(cè)試劑盒 寶藿苷I2-環(huán)己溴乙烷 98% ACS
紅激因子(ESF)檢測(cè)試劑盒 寶藿苷II;大花羊藿苷A;意卡瑞苷A5-溴-2-氟苯 97% 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9%
腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)檢測(cè)試劑盒 杯莧甾5-溴-5-硝-1,3-二惡烷 98% 電子級(jí)
腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)檢測(cè)試劑盒 北美芹素Nα-苯酰-DL-精氨酰-β-萘 97% ACS 光譜級(jí), ≥99.9%
生長(zhǎng)激素釋放因子(GH-RF)檢測(cè)試劑盒 貝萼皂苷元赫斯特?zé)晒馊剂希?3258 98% LC-MS,≥99.9%
生長(zhǎng)激素釋放因子(GH-RF)檢測(cè)試劑盒 貝母素苯并[e]芘 分析標(biāo)準(zhǔn)品 色譜級(jí)+, ≥99.9%
NADMDHNAD蘋(píng)果酸脫氫酶檢測(cè)試劑盒微量法大鼠骨保護(hù)素配體石杉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人神經(jīng)髓鞘蛋白矢車菊素-3-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人精氨加壓素使君子(使君子仁)(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白首烏藤(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
小鼠CXC趨化因子配體16熟地黃(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
小鼠高敏三狀腺原氨鼠尾草酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA鼠尾草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
人垂體腺苷環(huán)化酶激活肽薯莨(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
人微管相關(guān)蛋白2薯苷;重樓皂苷III(標(biāo)準(zhǔn)品)Human