購(gòu)買客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購(gòu)的F-BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50品牌、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說(shuō)明書(shū)并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。
F-BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50品牌操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營(yíng)養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí)，30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。
?
F-BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50品牌細(xì)胞的種類：
*種：
是凍存產(chǎn)品，由液氮直接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不*這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，*進(jìn)口來(lái)源，*保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3
PLK1 Others Mouse 小鼠 PLK1 / PLK-1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
SGC-7901細(xì)胞，胃腺癌細(xì)胞 人食管癌細(xì)胞,Eca-109細(xì)胞 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]
人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞cDNAHRCEpiC cDNA
VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / CD106 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人腎癌細(xì)胞;A498
ERBB3 Others Human 人 HER3 / ErbB3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CM-R042大鼠直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
SGC7901細(xì)胞，人低分化胃癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)染了tk基因的SW038-C2細(xì)胞,SW038-C2-tk細(xì)胞 長(zhǎng)尾綠猴腎細(xì)胞;4647
COS-1(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CCL1 Others Human 人 CCL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3
PLK1 Others Mouse 小鼠 PLK1 / PLK-1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
SGC-7901細(xì)胞，胃腺癌細(xì)胞 人食管癌細(xì)胞,Eca-109細(xì)胞 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]
人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞cDNAHRCEpiC cDNA
VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / CD106 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
630proteinstain630NM蛋白染色試劑25克BS
1313-27-5三氧化鉬Molybdenum trioxide
Cordycepspolysaccharide蟲(chóng)草多糖25克CP
4--3-甲氧基 4-Fluoro-3-methoxy,97% 128495-46-5 1G 通用試劑
鄰乙氧基苯/水楊酸/2-乙氧基苯/2-Ethoxybenzoic acid BR，98% 25克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
鈉一水物/鹽一水物/二鈉鹽一水物/Sodium malonate monohydrate CP，99% 25克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
本二酸二烯丙酯shēng huà shì jì容量：100克
蛋柏酶,細(xì)菌 (-20℃) qC 3.4.21.14 9014-1-1
Boc-4-aminopyridine-3-boronic acid 863752-59-4
無(wú)水磷酸鈉/無(wú)水磷酸三鈉/三堿式磷酸鈉/原磷酸三鈉/正磷酸鈉/磷酸鈉/TSP CP，98% 500克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
F-BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50品牌偶氮脒類引發(fā)劑V59shēng huà shì jì容量：10克
1887-02-1四羥基-1，4-本醌二鈉鹽TETRAxy7noXY-1,4-BENZOinoneONE DIwo7ium SALT
化銫，英文名或英文縮寫(xiě)：Cesium iodide，級(jí)別：BR，97%，規(guī)格：250克
叔戊基苯 tert-Amylbenzene,97% 2049-95-8 25ML 通用試劑
/基甲醛/ AR，99.5%， 500毫升 國(guó)產(chǎn)
F-BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50品牌注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
