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Lec1細(xì)胞（倉鼠卵巢細(xì)胞 Lec1）

2025年06月17日 12:52通派（上海）生物科技有限公司點擊量：3

細(xì)胞：Lec1細(xì)胞

中文名稱：倉鼠卵巢細(xì)胞

生長特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請嚴(yán)格遵照無菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時間，通常控制在 1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

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正常對照組心肌細(xì)胞置于95% 空氣/5% CO2環(huán)境下培養(yǎng). 結(jié)果顯示, 缺氧24 h能增加培養(yǎng)介質(zhì)中NO, 硫代巴比_妥酸反應(yīng)產(chǎn)物(TBARS)和乳酸脫氫酶(LDH)水平, 再給氧降低培養(yǎng)介質(zhì)中NO和水平, 增加TBARS和LDH水平. 

（人HCCC-9810細(xì)胞膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞）（人HGC-27細(xì)胞胃癌細(xì)胞）

缺氧上調(diào)bcl-2, p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平, 而再給氧下調(diào)bcl-2蛋白表達(dá)水平, 上調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平. 

（人HO-8910細(xì)胞卵巢癌細(xì)胞）（人HO-8910PM細(xì)胞卵巢癌細(xì)胞）

同時, 缺氧增加心肌細(xì)胞凋亡率, 而再給氧增加心肌細(xì)胞壞死率. NO供體硝普_鈉(SNP)增加培養(yǎng)介質(zhì)中和TBARS水平, 下調(diào)bcl-2蛋白表達(dá)而上調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平, 增加DNA斷裂、凋亡及壞死細(xì)胞率. （人IMR-32細(xì)胞神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞）（人KP-N-NS細(xì)胞腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞）

L-NAME和 SOD/CAT分別降低培養(yǎng)介質(zhì)中和TBARS水平, 它們均能上調(diào)bcl-2蛋白表達(dá)而下調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平, 抑制DNA斷裂、凋亡及壞死細(xì)胞率, 而D-NAME則無此作用. 

（人LS 180細(xì)胞結(jié)腸腺癌細(xì)胞）（人LTEP-s細(xì)胞肺鱗癌細(xì)胞）

以上結(jié)果表明, 在缺氧再給氧所致心肌細(xì)胞死亡過程中, NO和氧自由基參與下調(diào)bcl-2蛋白表達(dá)水平和上調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平, 相應(yīng)地激發(fā)細(xì)胞凋亡程序, 并提示一氧化氮及氧自由基誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的機(jī)制與調(diào)節(jié) bcl-2, p53和p21/waf1/cip1信號通路有關(guān).


關(guān)鍵詞：培養(yǎng)箱
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