細胞名稱 牛甲狀腺細胞系;hTERT-BTY品牌
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商,提供牛甲狀腺細胞系;hTERT-BTY品牌的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
Anti-Cyclin F/FITC 熒光素標(biāo)記周期素F抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Lingo-1/FITC 熒光素標(biāo)記Nogo受體作用蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Caspase 8 半*蛋白酶8抗體 規(guī)格 0.1ml
ELAVL1/HuR peptide ELAVL1/HuR多肽抗原 0.5mg
HCP5 英文名稱: 血紅素轉(zhuǎn)運蛋白5抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SIP1/ZEB-2 運動神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-Lingo-1/FITC 熒光素標(biāo)記Nogo受體作用蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
(MMP-7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶7Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-OPG 骨保護蛋白/護骨素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 規(guī)格 0.1ml
LMA(Human anti-liver cell membrane antibody) ELISA Kit 人抗肝細胞膜抗體 96T
PIWIL3 英文名稱: piwi樣3蛋白抗體 0.1ml
C17orf77 英文名稱: 17號染色體開放閱讀框77抗體 0.2ml
Anti-OPG 骨保護蛋白/護骨素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-Phospho-MKP1 (Ser359)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TP II A/TOP2a/FITC 熒光素標(biāo)記DNA拓普西異構(gòu)酶ⅡA抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABHD13 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體 規(guī)格 0.2ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
GCN2 英文名稱: 蛋白激酶GCN2蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh RAB6B RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB6B抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-TP II A/TOP2a/FITC 熒光素標(biāo)記DNA拓普西異構(gòu)酶ⅡA抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-CD158a/KIR2DL1/FITC 熒光素標(biāo)記NK細胞抑制性受體2DL1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-IL-3/FITC (mouse, rat) 熒光素標(biāo)記白介素3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CD335/NKp46/NCR1 細胞毒性受體NK-p46抗體 規(guī)格 0.2ml
E-cadherin E-鈣粘附分子抗原 0.5mg
IMPDH1 英文名稱: *單磷酸脫氫酶1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SULT1E1/Estrogen Sulfotranferase 雌激素轉(zhuǎn)移酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-IL-3/FITC (mouse, rat) 熒光素標(biāo)記白介素3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml