細(xì)胞名稱 黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞；NRm品牌
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性黑化型挪威大鼠的肺組織。1985年由*昆明細(xì)胞庫(kù)建立。

培養(yǎng)條件 M-199：

with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS  

傳代方法 1：

2傳代；3-4天一次  

傳代情況 P2

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測(cè) 熒光法（-）　

STR -

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞；NRm品牌的報(bào)價(jià)，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購(gòu)。

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

Anti-phospho-IKK gamma (Ser85) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶gamma抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Phospho-Rb (Ser780)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh APR3/C2orf28 凋亡相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml

Rabbit anti-MG IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 0.3ml

GRO gamma/CXCL3 英文名稱： 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因gamma(GROγ)抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit anti-MG IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.3ml

Anti-Phospho-Rb (Ser780)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
FDFT1(Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1) ELISA Kit 人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-MuRF1/Trim63 肌肉細(xì)胞特異性泛素蛋白連接酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Importin4/RanBP4 核蛋白4抗體(Ran結(jié)合蛋白4) 規(guī)格 0.2ml

SCL70/topo I (Human anti-scl70 antibody) ELISA Kit 人抗硬皮病抗體70 96T

presenilin 1 英文名稱： 早老素蛋白-1抗體 0.1ml

CCDC72 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白72抗體 0.1ml

Anti-MuRF1/Trim63 肌肉細(xì)胞特異性泛素蛋白連接酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-MTF-1/FITC 熒光素標(biāo)記金屬反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-URGCP/URG4/FITC 熒光素標(biāo)記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

促腎上腺皮質(zhì)激素抗體 Anti-ACTH 0.1ml

Mouse Anti-Goat IgG/APC APC標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

GMPPA 英文名稱： GDP甘露糖焦磷酸化酶抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PRPH2 外周蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-URGCP/URG4/FITC 熒光素標(biāo)記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-HSP-47/FITC 熒光素標(biāo)記熱休克蛋白-47蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-Phospho-Pin1 (Ser16)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化肽基脯氨酞順?lè)串悩?gòu)酶Pinl抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ASF1A 細(xì)胞衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體 規(guī)格 0.1ml

Donkey Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml

GLT28D1 英文名稱： 糖基轉(zhuǎn)移酶28家族1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-mouse IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-Phospho-Pin1 (Ser16)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化肽基脯氨酞順?lè)串悩?gòu)酶Pinl抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml