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2025年06月14日 11:35通派(上海)生物科技有限公司點(diǎn)擊量:3
細(xì)胞:3T3F442A細(xì)胞
中文名稱(chēng):小鼠脂肪細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%CS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢萠酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員,以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員,避免不必要的損失;)
如果僅僅將自我更新因子去除,干細(xì)胞還是會(huì)停留在自我更新?tīng)顟B(tài)。只有加入了Mbd3細(xì)胞才會(huì)開(kāi)始分化為特定的細(xì)胞,有助于了解小鼠胚胎干細(xì)胞和人類(lèi)胚胎干細(xì)胞之間的不同。小鼠胚胎干細(xì)胞需要蛋白LIF以幫助自我更新;
(大鼠L6細(xì)胞 成肌細(xì)胞)(小鼠LA795細(xì)胞 肺腺癌細(xì)胞)
人類(lèi)胚胎干細(xì)胞中不需要LIF。而Mbd3缺失的小鼠胚胎干細(xì)胞則出現(xiàn)像人類(lèi)干細(xì)胞的現(xiàn)象:不需要LIF以進(jìn)行自我復(fù)制。因此這種胚胎干細(xì)胞可以作為一種人類(lèi)干細(xì)胞研究模式,因?yàn)樗灰狶IF以繼續(xù)復(fù)制。
(小鼠LtK-11細(xì)胞結(jié)締組織細(xì)胞)(兔N/N1003A細(xì)胞晶體上皮細(xì)胞)
Mbd3是重塑核小體與組蛋白去乙?;瘡?fù)合物其中的一部分。此復(fù)合物起到表觀沉默作用,在細(xì)胞中對(duì)基因表達(dá)進(jìn)行調(diào)控;
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