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2025年06月09日 09:39通派(上海)生物科技有限公司點擊量:20
細胞:HIT-T15細胞
中文名稱:倉鼠beta胰島β細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
在受精過程中, 哺乳動物卵子細胞內(nèi)的鈣離子濃度呈現(xiàn)連續(xù)性反復升高.
有證據(jù)表明: 將受精的1-和2-細胞期的胚胎細胞核移植到未受精卵中能導致卵子產(chǎn)生鈣升高并使該重構(gòu)胚激活.
(人 Caco-2細胞 結(jié)直腸腺癌細胞)(人 Ca Ski細胞 癌細胞)
然而, 尚不清楚胚胎細胞核這種誘導卵子內(nèi)鈣升高的能力是如何獲得的, 是否處于不同發(fā)育階段的早期胚胎細胞核都具有這種能力. (人 D341 Med細胞髓母細胞瘤細胞)(人 DMF7細胞 腎細胞)
利用細胞核移植技術(shù), 將小鼠受精早期胚胎細胞核移植到成熟卵母細胞中, 并測定該重構(gòu)胚細胞內(nèi)鈣含量變化
(人 HCT-8細胞 結(jié)直腸腺癌細胞)(人 HEC-1-B細胞 子宮內(nèi)膜腺癌細胞)
結(jié)果表明:受精1-和2-細胞期的細胞核具有誘導成熟卵子鈣釋放活性的功能, 而4-和8-細胞期細胞核、融合的2或3個4-細胞期的細胞核及乙醇孤雌活化的原核均不具有這種能力.
(小鼠 Hepa 1-6細胞 肝癌細胞)(人 CCC-HPF-1細胞 胚肺成纖維細胞)
結(jié)果說明:胚胎細胞核誘導卵子細胞內(nèi)鈣升高的能力是受精過程中產(chǎn)生的, 是受精胚特_有的, 它存在于早期受精胚的特殊發(fā)育階段. 這暗示早期受精胚這一特_有的能力對胚胎的正常發(fā)育具有重要意義.
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