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2025年06月04日 08:18通派(上海)生物科技有限公司點(diǎn)擊量:22
細(xì)胞:H1573細(xì)胞
中文名稱:人肺腺癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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哺乳動物細(xì)胞核的各個組成部分,都不是隨機(jī)排列的,它們的排列模式可以用統(tǒng)計學(xué)方法測量,這種發(fā)現(xiàn)有助于研究細(xì)胞的運(yùn)作機(jī)制,對癌癥等疾病中,細(xì)胞核功能障礙進(jìn)行解釋。
發(fā)現(xiàn)支配一種重要控制蛋白在細(xì)胞核內(nèi)分布的空間相關(guān)性,與哺乳動物細(xì)胞核內(nèi)其它成分相關(guān)。CBP蛋白分布廣泛,作用于細(xì)胞核內(nèi)的特定基因,并控制這些基因在細(xì)胞周期的特定時間內(nèi)表現(xiàn)。
利用熒光染劑對細(xì)胞核內(nèi)的成分進(jìn)行標(biāo)記,以鑒定CBP濃縮區(qū)(concentrated pocket)。在顯微鏡下觀察到的,是一個非常復(fù)雜的模式。
接下來,對細(xì)胞核組成分中最近的鄰居之距離進(jìn)行測量,研制出一種工具,可以針對核內(nèi)可能與CPB有關(guān)的其它蛋白、基因域進(jìn)行測定,還研制出一種模型,可用來分析更易定位于CBP袋附近的成分,最后得到了由CPB濃縮定位驅(qū)動的細(xì)胞核組分定位的細(xì)胞核圖譜。
之所以選擇CPB,是因為CPB是一個研究相當(dāng)透徹的基因調(diào)節(jié)劑,它可以改變作用基因的部分結(jié)構(gòu)而啟動基因并表現(xiàn)特殊蛋白。利用熒光染料和成熟的影像技術(shù),發(fā)現(xiàn)CPB區(qū)更傾向于定位在其作用的基因域附近。
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