液相色譜柱的活化操作

2025年03月19日 10:53上海三為科學(xué)儀器有限公司點(diǎn)擊量：48

液相色譜柱的活化操作，以常見的C18反相分析柱為例，出廠時(shí)一般都封裝有甲醇或乙腈等有機(jī)溶劑。隨著時(shí)間的推移，色譜柱內(nèi)的有機(jī)溶劑緩慢揮發(fā)，色譜柱內(nèi)可能出現(xiàn)氣泡。因此，新購買的色譜柱在使用前一般都要進(jìn)行活化操作。

下面以常見的4.6mm X 150mm, 5μm粒徑的C18反相分析柱為例：

1. 在活化色譜柱前，應(yīng)先用相關(guān)試劑沖洗液相系統(tǒng)的流路，確保無污染物殘留。切換至封柱試劑（一般為甲醇或乙腈），置換流路內(nèi)的試劑。

2. 停泵，將分析柱的進(jìn)液口連上系統(tǒng)，移除出液口的堵頭，出液口不連上系統(tǒng)。傾斜放置色譜柱，使其出液口高于入液口。

3. 以0.1ml/min的流速沖洗色譜柱約5分鐘，切換至0.2ml/min的流速繼續(xù)沖洗。觀察色譜柱出液口，若連續(xù)出液，停泵，將色譜柱出液口接入液相系統(tǒng)。

4. 以0.1ml/min的流速沖洗色譜柱，5分鐘內(nèi)將流速平穩(wěn)提升至0.5ml/min繼續(xù)沖洗色譜柱。

5. 以0.5ml/min的流速沖洗色譜柱，期間觀察壓力與基線是否平穩(wěn)，直到?jīng)_洗的總流量達(dá)到30個(gè)柱體積。

6. 活化完成。

對于久置不用的類似型號色譜柱，再次使用前也可參考上述步驟進(jìn)行活化。

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