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木質(zhì)素檢測試劑盒

2021年06月28日 00:53合肥萊爾生物科技有限公司點(diǎn)擊量：400

注意：正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

規(guī)格：100T/96S

產(chǎn)品內(nèi)容：

試劑一：液體 34mL×1 瓶，4℃保存。每次用完用封口膜密封保存。

試劑二：液體 30mL×1 瓶，4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 支，50mg 木質(zhì)素，4℃保存。臨用前加入 1mL 高氯酸，充分混勻溶解，配成50mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明：

木質(zhì)素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的成分之一，具有使細(xì)胞相連的作用。木質(zhì)素存在于木質(zhì)組織中，主要作用是通過形成交織網(wǎng)來硬化細(xì)胞壁，為次生壁主要成分。
木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙?；笤?280nm 處有特征吸收峰，280nm 的吸光值高低與木質(zhì)素含量正相關(guān)。

試驗中所需的儀器和試劑：

紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、EP 管、封口膜、高氯酸、冰乙酸和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣品處理：樣品 80℃烘干至恒重，粉碎，過 40  目篩，稱取約 3mg 于 1.5mLEP 管中。二、測定步驟：

1、分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 280nm，冰乙酸調(diào)零。

2、操作表：在 1.5ml玻璃管中依次加入下列試劑：

 

測定管

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管

樣品（mg）

3

-

-

試劑一（µL）

300

300

300

高氯酸（µL）

12

-

12

標(biāo)準(zhǔn)液（µL）

-

12

-

封口膜密封，充分混勻。于 80℃水浴鍋水浴 40min，進(jìn)行乙?；Ｃ扛?10min 震蕩一次，

然后自然冷卻。

試劑二（µL）

300

300

300

充分混勻后于常溫 8000g 離心 10min，取上清。

上清液（µL）

12

12

12

 

 

 

 

 

三、木質(zhì)素含量計算：

C 標(biāo)準(zhǔn)=C 原液×V 標(biāo)準(zhǔn)÷V 乙?；?times;V 上清÷V 檢測=0.0196 mg/mL
木質(zhì)素（mg/g）= △A÷（△A 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)準(zhǔn)）×V 檢測÷（W×V 上清÷V 乙酰化）
= 0.5998×△A÷△A 標(biāo)準(zhǔn)÷W

C 標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)液在最終檢測體系中的濃度，0.0196 mg/mL；C 原液：標(biāo)準(zhǔn)液濃度，50mg/mL；V 標(biāo)準(zhǔn)：加入的標(biāo)準(zhǔn)液的體積，0.012mL；V 乙酰化：乙?；磻?yīng)體積，0.612mL；V 上清：上清液體積，0.012mL；V 檢測：檢測反應(yīng)總體積，0.6mL；W：樣本質(zhì)量，g。1、試劑一有毒性，請操作時

注意事項：

1、做好防護(hù)措施，加熱前必須用封口膜密封，以防氣體溢出。

2、加熱過程中有劇烈反應(yīng)，震蕩時輕搖，以免壓力過大噴出造成人身傷害。

3、冰乙酸具有強(qiáng)刺激性，建議操作過程全部在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。

4、取上清加冰乙酸步驟根據(jù)自己樣品乙?；潭?，冰乙酸的用量可調(diào)整，保證吸光值在 0.1-0.8 之間即可，并在公式中參與計算。

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