人C型鈉尿肽ELISA試劑盒實驗原理

2011年07月20日 11:02上海科興商貿(mào)有限公司點擊量：1751

人C型鈉尿肽ELISA試劑盒自備材料：
1. 蒸餾水。
2. 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

人C型鈉尿肽ELISA試劑盒實驗原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人C型鈉尿肽（CNP）水平。用純化的人C型鈉尿肽（CNP）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入C型鈉尿肽（CNP），再與HRP標(biāo)記的C型鈉尿肽（CNP）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C型鈉尿肽（CNP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人C型鈉尿肽（CNP）濃度。

人C型鈉尿肽ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法：

1、血清……操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
5、保存……如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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