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人白介素ELISA試劑盒實驗中的常見問題以及注意事項

2020年04月01日 09:55上海博湖生物科技有限公司點擊量:490

ELISA試劑盒實驗中總會出現(xiàn)各種各樣的問題,但是,只要操作人員掌握了一定的技巧,就可輕松找到問題的所在。以下內(nèi)容分析人白介素ELISA試劑盒實驗中的常見問題以及注意事項:

1、陰性對照顯色

2、整板不顯色

3、同一板內(nèi)重復(fù)性差

4、陽性對照讀數(shù)不正常

5、血清本底高

6、HCV血清本底高

7、HIV陽性對照低

8、陽性對照不顯色

9、陽性對照顯色淺

10、HIV血清本底高

11、假陽性結(jié)果

白介素ELISA試劑盒實驗操作注意事項:
1、 從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2、各步驟加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校準(zhǔn)其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

3、每次試驗測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔zui高濃度的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n)。

4.手工洗板應(yīng)注意:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

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