細(xì)胞株樣品收集

2017年10月30日 09:42上海邦景實業(yè)有限公司點擊量：277

細(xì)胞株樣品收集:
1. 血清：全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。
2. 血漿：抗凝劑推薦使用EDTA.Na2，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。避免使用溶血，高血脂樣品。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。
4. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，以去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將*碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣本對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
5. 其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測.
6. 樣品應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。
7. 樣品收集后若不及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃/-80℃冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融，1-6月內(nèi)檢測，4℃保存的應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測。
8. 如果您的樣本中檢測物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值，請根據(jù)實際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋（建議先做預(yù)實驗，以確定稀釋倍數(shù)）。
細(xì)胞株T/E   */EDTA消化液   100 ml
TNS   *中和液   100 ml
NECDS   非酶細(xì)胞裂解液   100 ml
CFM   細(xì)胞凍存液   50 ml
SF-CFM   無血清細(xì)胞凍存液   50 ml
TB   臺盼藍(lán)   50 ml
DPBS   磷酸鹽緩沖注   500 ml
HBSS   *   500 ml
PLL   多聚賴氨酸 1 mg/ml   1 ml
PLL   多聚賴氨酸10 mg/ml   1 ml
FBS   胎牛血清   500 ml
P/S   */*溶液   5 ml
P/S   */*溶液   100 ml
AMS   抗真菌溶液   50 ml
ABAMS   抗霉菌溶液   50 ml
CCGW   細(xì)胞培養(yǎng)超純水   500 ml
MDS   肌細(xì)胞分離液   100 ml
BPE   牛腦垂體提取物   25 mg
BPE   牛腦垂體提取物   100 mg
ITS   胰島素鐵硒傳遞蛋白 100x   10 ml
L-Gue   左旋*溶液 200 mM   100 ml
NEAA   非必需氨基酸 100X   100 ml
BPF   纖維粘連蛋白-牛源   1mg
Col   I 型膠原細(xì)胞檢測試劑盒   48 tests/48 well plate
Fibro   纖維母細(xì)胞粘附檢測試劑盒   48 tests/48 well plate細(xì)胞株

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