PCR技術(shù)基本原理

2016年07月22日 14:02研生elisa 銷售網(wǎng)點(diǎn)（上海研生實(shí)業(yè)有限公司）點(diǎn)擊量：989

　　PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：
　　
　　①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；
　　
　　②模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；
　　
　?、垡锏难由欤篋NA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。到達(dá)平臺(tái)期（Plateau）所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。
　　
　　PCR技術(shù)的基本原理PCR的三個(gè)反應(yīng)步驟反復(fù)進(jìn)行，使DNA擴(kuò)增量呈指數(shù)上升。反應(yīng)zui終的DNA擴(kuò)增量可用Y＝（1＋X）n計(jì)算。Y代表DNA片段擴(kuò)增后的拷貝數(shù)，X表示平（Y）均每次的擴(kuò)增效率，n代表循環(huán)次數(shù)。平均擴(kuò)增效率的理論值為100%，但在實(shí)際反應(yīng)中平均效率達(dá)不到理論值。反應(yīng)初期，靶序列DNA片段的增加呈指數(shù)形式，隨著PCR產(chǎn)物的逐漸積累，被擴(kuò)增的DNA片段不再呈指數(shù)增加，而進(jìn)入線性增長期或靜止期，即出現(xiàn)“停滯效應(yīng)”，這種效應(yīng)稱平臺(tái)期數(shù)、PCR擴(kuò)增效率及DNA聚合酶PCR的種類和活性及非特異性產(chǎn)物的竟?fàn)幍纫蛩?。大多?shù)情況下，平臺(tái)期的到來是不可避免的。

上一篇：液動(dòng)偏心半球閥詳細(xì)說明

下一篇：8路視頻光端機(jī)價(jià)格情況及注意事項(xiàng)介紹

版權(quán)與免責(zé)聲明： 凡本網(wǎng)注明“來源：智慧城市網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-智慧城市網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：智慧城市網(wǎng)www.duty-free.cn”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。

本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其它來源（非智慧城市網(wǎng)www.duty-free.cn）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)或和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。

免費(fèi)注冊(cè)后，你可以
了解安防行業(yè)更多資訊查看安防行業(yè)供求信息凸顯安防行業(yè)自身價(jià)值馬上注冊(cè)會(huì)員
想快速被買家找到嗎
只需要發(fā)布一條商機(jī)，被買家找到的機(jī)會(huì)高達(dá)90%！還等什么？馬上發(fā)布信息

編輯精選

雷達(dá)流速儀—安裝調(diào)試簡便，操作維護(hù)容易

雷達(dá)流速儀是利用雷達(dá)波測(cè)量水流速度的專業(yè)儀器。該儀器測(cè)量時(shí)不接觸水體，避免傳
廣東佛山人臉識(shí)別門禁系統(tǒng)、人行通道擺閘/

清晨，佛山某小區(qū)業(yè)主張女士懷抱快遞與菜蔬，未等騰出手刷卡，人臉識(shí)別系統(tǒng)已無聲
兩戰(zhàn)告捷不松勁，持續(xù)護(hù)航再出發(fā)--記“430

AcrelEMS3.0智慧能源管理平臺(tái)可以幫助用戶管理數(shù)量眾多的分布式光伏、儲(chǔ)能系統(tǒng)、
電表的“雙碳蝶變”：從電量統(tǒng)計(jì)員到碳足跡

以安科瑞AEM96電碳表為例，它不僅能實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)三相電力參數(shù)，還能結(jié)合動(dòng)態(tài)更新的電
安科瑞ADL400N-CT系列儲(chǔ)能計(jì)量表精準(zhǔn)掌控能

在“雙碳”目標(biāo)驅(qū)動(dòng)下，工商業(yè)分布式光伏與儲(chǔ)能市場迎來爆發(fā)式增長。然而，如何高
直流絕緣監(jiān)測(cè)儀在直流充電樁的應(yīng)用

AIM-D100系列直流絕緣監(jiān)測(cè)儀專門為了直流絕緣監(jiān)測(cè)設(shè)計(jì)，可以應(yīng)用在10~1500V的直流
病蟲害監(jiān)測(cè)系統(tǒng)——農(nóng)田病蟲害進(jìn)行多層次的

它主要聚焦于對(duì)蟲害的發(fā)生與發(fā)展進(jìn)行深度分析和精準(zhǔn)預(yù)測(cè)，為現(xiàn)代農(nóng)業(yè)提供智能化的
智能吸蟲塔——專為長期監(jiān)測(cè)小型遷飛性昆蟲

該設(shè)備的工作原理巧妙且高效，通過空氣動(dòng)力裝置產(chǎn)生的強(qiáng)力抽吸作用，將飛過其上方

本站精選

交通領(lǐng)域動(dòng)態(tài)速覽｜八部門就汽車數(shù)據(jù)出境安

交通建設(shè)是經(jīng)濟(jì)增長的重要推動(dòng)力，促進(jìn)經(jīng)濟(jì)增長和擴(kuò)大就業(yè)。小編在本文中對(duì)交通領(lǐng)
地方工信快報(bào)來了｜云南、海南、上海......

智慧城市提升資源利用效率，改善居民生活質(zhì)量的城市發(fā)展模式。作為與智慧城市行業(yè)
智慧城市一周熱點(diǎn)回顧｜第二屆中關(guān)村具身智

2025年6月9日-6月15日，智慧城市領(lǐng)域有哪些動(dòng)態(tài)變化發(fā)生？一起來看看！
一文回顧近期安防要聞（5月30日-6月8日）

隨著技術(shù)進(jìn)步，安防在城市發(fā)展中的作用將更加突出。近期有哪些大事發(fā)生？一起來看
地方工信快報(bào)來了｜北京、湖北、湖南......

智慧城市提升資源利用效率，改善居民生活質(zhì)量的城市發(fā)展模式。作為與智慧城市行業(yè)
交通領(lǐng)域動(dòng)態(tài)速覽｜湖南湘江新區(qū)再發(fā)放一批

交通建設(shè)是經(jīng)濟(jì)增長的重要推動(dòng)力，促進(jìn)經(jīng)濟(jì)增長和擴(kuò)大就業(yè)。小編在本文中對(duì)交通領(lǐng)
智慧城市一周熱點(diǎn)回顧｜實(shí)施“人工智能制造

2025年6月2日-6月8日，智慧城市領(lǐng)域有哪些動(dòng)態(tài)變化發(fā)生？一起來看看！
交通領(lǐng)域動(dòng)態(tài)速覽｜四川新能源汽車動(dòng)力電池

交通建設(shè)是經(jīng)濟(jì)增長的重要推動(dòng)力，促進(jìn)經(jīng)濟(jì)增長和擴(kuò)大就業(yè)。小編在本文中對(duì)交通領(lǐng)