WNK1激酶介導(dǎo)T細(xì)胞體內(nèi)粘附與遷移平衡

T細(xì)胞能夠持續(xù)地在淋巴器官、淋巴管以及血液系統(tǒng)之間的循環(huán)，它們通過高內(nèi)皮靜脈（HEV）從血液進(jìn)入淋巴結(jié)中。zui初的選擇素（Selectin）能夠介導(dǎo)T細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞相接觸，之后，CCL21能夠與T細(xì)胞表面的CCR7導(dǎo)致其表面的粘附分子，例如LFA的激活。LFA與其配體ICAM1與ICAM2的結(jié)合能夠?yàn)?/span>T細(xì)胞與上皮細(xì)胞形成有力的粘附作用。之后T細(xì)胞受到CCL19以及CCL21的誘導(dǎo)能夠遷移穿透內(nèi)皮細(xì)胞并進(jìn)入淋巴結(jié)中。zui后，T細(xì)胞通過淋巴管離開淋巴結(jié)并再次通過靜脈系統(tǒng)進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)。

這種反復(fù)循環(huán)的過程對于T細(xì)胞接受來自抗原呈遞細(xì)胞的刺激十分關(guān)鍵。TCR與MHC-抗原復(fù)合體的結(jié)合能夠?qū)е?/span>T細(xì)胞停止遷移，并激活LFA-1。之后T細(xì)胞與APC形成穩(wěn)定有力的結(jié)合，這一結(jié)合對于T細(xì)胞的激活具有重要的意義。

LFA-1受到趨化因子受體的刺激而激活，之后能夠?qū)е抡纤氐臉?gòu)象發(fā)生改變。LFA從低親和度的構(gòu)象轉(zhuǎn)變?yōu)檠由斓摹㈤_放的、高親和度的構(gòu)象。這一信號同時(shí)能夠?qū)е掳麅?nèi)talin與kindlin-3與LFA-1胞內(nèi)段結(jié)合，F-actin與talin的結(jié)合以及LFA-1的聚集。這些變化zui終導(dǎo)致LFA-1與其配體親和力的大幅上升。

GTPase RAP1是能夠介導(dǎo)來自趨化因子受體產(chǎn)生該信號的關(guān)鍵胞內(nèi)蛋白。激活后的RAP1能夠與RIAM與RAPL結(jié)合，進(jìn)而促進(jìn)talin與LFA-1 B亞基的結(jié)合以及LFA-1的聚集。

為了進(jìn)一步鑒定其它可能激活LFA-1的蛋白，來自英國Francis Crick 研究所的Victor L J Tybulewicz課題組進(jìn)行了深入研究，相關(guān)結(jié)果發(fā)表在zui近一期的《nature immunology》雜志上。

首先，作者通過RNAi篩選的手段下調(diào)了Jurkat細(xì)胞細(xì)胞中719個(gè)激酶相關(guān)基因的表達(dá)量。通過篩選，他們找到了一類叫做WNK1的蛋白。WNK1的下調(diào)能夠提高T-B細(xì)胞的相互作用?？乖T導(dǎo)的T細(xì)胞與APC的結(jié)合主要由T細(xì)胞表面的LFA-1與APC表面的ICAM-1的相互作用。為了驗(yàn)證WNK1下調(diào)引發(fā)的相互結(jié)合的增強(qiáng)本質(zhì)上是LFA-1與ICAM-1結(jié)合能力的上升，作者檢測了T細(xì)胞與ICAM1蛋白復(fù)合體的結(jié)合能力。結(jié)果顯示，WNK1的下調(diào)確實(shí)能夠提高Jurkat細(xì)胞與ICAM1的結(jié)合能力。

進(jìn)一步，作者希望了解WNK1調(diào)節(jié)LFA-1活性的內(nèi)在機(jī)制。通過試驗(yàn)，作者發(fā)現(xiàn)WNK并不能改變LFA-1的構(gòu)象，而WNK1缺失或正常的T細(xì)胞在受到Mn離子的刺激（能夠直接提高LFA-1的活性）后，能夠同樣提高其與ICAM1的結(jié)合能力。這一結(jié)合表明WNK1可能調(diào)節(jié)了某些過程zui終影響了整合素與細(xì)胞骨架的結(jié)合或者整合素的聚集。之后，作者發(fā)現(xiàn)WNK1能夠負(fù)向地調(diào)節(jié)RAP1的活性，從而抑制LFA-1的構(gòu)象變化。

接下來，作者通過體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)WNK1在T細(xì)胞遷移過程中扮演了正向的調(diào)節(jié)角色。而在體內(nèi)環(huán)境中，WNK1對于T細(xì)胞向淋巴結(jié)中的遷移十分必要。

zui后，作者發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞中的WNK1活性能夠被CXCL12等趨化因子所激活，其中需要受到PI3K與AKT的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。WNK1的激活進(jìn)而調(diào)節(jié)T細(xì)胞的粘附或遷移活動。