ELISA試劑盒在使用前與室溫平衡，再進(jìn)行測定。在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間，這一保溫過程稱為溫育（incubation），有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。
ELISA試劑盒屬固相免疫測定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。
    如果對(duì)試劑準(zhǔn)備不太注意，在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來即用，而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問題影響后面的操作。測定中試劑的準(zhǔn)備zui為關(guān)鍵的是，在實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20min以上后，以使試劑盒       
2. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。
3. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。
4. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
5. 請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。ELISA試劑盒
6. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請(qǐng)先稀釋后再測定。
7. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制，ELISA試劑盒不能混淆。
8. 底物請(qǐng)避光保存。
9、控制好每一步的操作時(shí)間。

Mucin C    胃粘液素抗體
MMP-20    基質(zhì)金屬蛋白酶20抗體
Uromucoid    尿調(diào)節(jié)蛋白抗體
MEF2A    肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體
MyoD1/Myf3    肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體
MASH1    神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子抗體
MHC class I antigen B 15    組織相關(guān)抗原HLA-B15抗體
Methionine adenosyltransferase    蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶抗體
phospho-MAPK11(Thr180+Tyr182)    磷酸化絲裂原活化的蛋白激酶p38β抗體
phospho-MAP1LC3A(Ser12)    磷酸化自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體
MUC5B    粘蛋白-5B抗體
mucin3    粘蛋白-3抗體
Marek's Disease Vaccine, Live    雞馬立克氏病火雞皰疹病毒抗體
MDR1    多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體(C端)

ELISA試劑盒