關(guān)于ELISA試劑盒的每一步都要注意才行。 ELISA試劑盒加樣時的防錯小經(jīng)驗 （1）用一張寫滿字的紙，字越多越好，比如報紙，墊在下面，這樣，加過標本的小孔看過去下面的字會變小，沒加的字正常，非常容易區(qū)分。 （2）可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別 （3）在標本加完后，再把加樣槍全壓下，使液面產(chǎn)生小氣泡，也可以加以區(qū)分 3、棋盤試驗的操作方法： （1）將抗原按一定的梯度倍比稀釋后，按照ELISA從上到下（或者從左到右）的順序包被。 （2）將抗體按一定的梯度倍比稀釋后按照ELISA試劑盒從左到右或者從上到下加入。 （3）二抗的稀釋倍數(shù)是一定的，然后顯色，讀值。 OD值的測定時，波長要根據(jù)顯色劑的不同而定，一般上大家都使用TMB顯色，450nm讀值。根據(jù)讀值得結(jié)果可以選定合適的抗原和抗體效價，這就是棋盤 實驗的目的，如果抗原包被量已知而二抗的工作濃度不確定的話就用一抗和二抗作棋盤試驗。
注意事項

1．ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，ELISA試劑盒以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

CD45    白細胞共同抗原抗體
phospho-CREM (Ser271 +Ser 274)    磷酸化環(huán)磷酸腺苷反應元件調(diào)節(jié)蛋白抗體
Connexin-37    間隙連接蛋白37抗體
CD21    2型補體受體抗體
CD75    唾液酸轉(zhuǎn)移酶1/α-2,6唾液酸轉(zhuǎn)移酶抗體
Carbonate dehydratase IX    碳酸酐酶9抗體
CYP17    細胞色素P450 17抗體
CYP7A1    細胞色素P450 7A1抗體/膽固醇7a羥化酶
CYP46    膽固醇24羥化酶抗體
CHRDL2    腫瘤新因子1抗體
CYP7B1    膽固醇25α7羥化酶抗體
Cytokeratin 3+12    細胞角蛋白3+12抗體
Crkl    接頭蛋白CrkL抗體

ELISA試劑盒