細(xì)胞培養(yǎng)被支原體污染是個(gè)世界性問(wèn)題，在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%。支原體是一類(lèi)無(wú)細(xì)胞壁，形態(tài)呈高度多形性，為圓形、絲狀或梨形，其直徑僅有0.13～0.18μm，變形能力大，故能通過(guò)濾菌器，zui突出的結(jié)構(gòu)特征是沒(méi)有細(xì)胞壁，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素不敏感。研究表明，ELISA試劑盒 支原體能耗盡營(yíng)養(yǎng)物，促進(jìn)代謝積累，導(dǎo)致pH改變，對(duì)細(xì)胞造成多種影響，包括生長(zhǎng)狀況、生化特性、代謝、免疫、以及細(xì)胞存活等多方面的改變，繼而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，或造成無(wú)法解釋的差異。更加不幸的是拯救被感染的細(xì)胞幾乎是不可能的。那如何檢測(cè)你的細(xì)胞是否收到支原體的入侵呢？下面介紹了幾種檢測(cè)方式，或許對(duì)你的實(shí)驗(yàn)有用。

分離培養(yǎng)法是支原體檢測(cè)的金標(biāo)方法，其檢測(cè)度zui高。這種方法是從可疑的細(xì)胞培養(yǎng)體系中取樣，并接種到zui適宜支原體生長(zhǎng)的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體，它們就會(huì)在這種瓊脂平板上*生長(zhǎng)，zui終形成明顯可見(jiàn)的特征性菌落。分離培養(yǎng)法基本不會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果，因此被譽(yù)為支原體檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)。

但是，分離培養(yǎng)法也存在兩個(gè)弊端，一是檢測(cè)時(shí)間太長(zhǎng)，支原體要長(zhǎng)出明顯克隆至少需要4周時(shí)間。二ELISA試劑盒是盡管可以檢測(cè)絕大多數(shù)支原體種類(lèi)，分離培養(yǎng)法也有力所不及的時(shí)候

將可疑樣品與指示細(xì)胞共同培養(yǎng)，一般需要幾天時(shí)間。DNA檢測(cè)所用的指示細(xì)胞通常是細(xì)胞質(zhì)區(qū)域較大的Vero細(xì)胞，如果原樣本中含有支原體，那么當(dāng)細(xì)胞DNA被熒光染料（如Hoechst染料）染色時(shí)，就可以在指示細(xì)胞的核周?chē)^察到熒光斑點(diǎn)或熒光顆粒。

但是這種方法靈敏度太低，當(dāng)檢測(cè)成陽(yáng)性時(shí)，細(xì)胞經(jīng)常已經(jīng)嚴(yán)重污染。且Hoechst熒光染色：操作復(fù)ELISA試劑盒雜，操作不當(dāng)易造成假陽(yáng)性或假陰性。