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進(jìn)口ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
進(jìn)口ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被植物淀粉(Amy)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物淀粉(Amy)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度
進(jìn)口ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備
1. 原輔料的處理: 根據(jù)藥材的有效成分不同,可采用不同的溶劑和方法進(jìn)行提取,一般多用煎煮法提取有效成分,用等量乙醇精制時(shí)放置的時(shí)間、回收乙醇后放置的時(shí)間可根據(jù)實(shí)驗(yàn)安排情況,適當(dāng)延長(zhǎng),以沉淀*,上清液易于分離為宜。
2. 制顆粒:掌握濕法制粒的操作方法??刂魄甯嗟南鄬?duì)密度時(shí)由于量較小,不方便用比重計(jì)測(cè)量,也可用桑皮紙上測(cè)水印的方法適當(dāng)掌握,以不出現(xiàn)、或僅有少量水印為度;加輔料的量一般不超過清膏量的5倍,以手握之成團(tuán),觸之即散即可;如果軟材不易分散,可用乙醇調(diào)整干濕度,以降低黏性,易于過篩,并使得顆粒易于干燥。
3. 干燥與整粒:濕顆粒立即在60~80 ℃常壓干燥。整粒后將芳香揮發(fā)性物質(zhì)、對(duì)濕熱不穩(wěn)定的藥物加到干顆粒中。
4. 顆粒劑易吸潮變質(zhì),為保證顆粒劑質(zhì)量,應(yīng)選擇適宜的包裝材料進(jìn)行包裝。
二、具體操作
將大清葉,板藍(lán)根,連翹,拳參四味,加純化水煎煮2次,每次1.5小時(shí),合并煎液,濾過,濾液濃縮至相對(duì)密度約為1.08(90~95 ℃),待冷至室溫,加等量的乙醇使沉淀,靜置;取上清液濃縮至相對(duì)密度1.20(60~65 ℃),加等量的水,攪拌,靜置8小時(shí),取上清液濃縮成相對(duì)密度為1.38~1.40(60~65 ℃)的清膏。取清膏1份、蔗糖粉3份、糊精1.25份及乙醇適量,制成顆粒,干燥,即得。
進(jìn)口ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
1. 為使成品純凈,提取液濃縮至相對(duì)密度約為1.08加等量的乙醇使沉淀,以除去樹膠,蛋白等雜質(zhì),同時(shí)便于制粒。
2. 制備的糖粉需600 °C干燥,除去結(jié)晶水
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