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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>甲基化分析解決的難題
ELISA試劑盒外形和DNA都高度相似的兩個(gè)人是很難分辨的。而且這并不*是編劇們“腦洞大開”的結(jié)果,
雙胞胎來自于同一個(gè)受精卵,他們的DNA序列在理論上是*相同的。不過DNA復(fù)制會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤,個(gè)體發(fā)育過程中也會(huì)出現(xiàn)其他突變。如果鑒定了雙胞胎之間的突變差異,就可以在*現(xiàn)場(chǎng)的樣本中尋找相應(yīng)的突變,不過通過全基因組測(cè)序來分辨雙胞胎,成本是相當(dāng)高的。
DNA甲基化是一種重要的表觀遺傳學(xué)改變,會(huì)受到環(huán)境因素的影響。研究人員利用這一點(diǎn),開發(fā)了在同卵雙胞胎中檢測(cè)DNA甲基化差異的方法。
這個(gè)方法將重亞硫酸鹽處理(將未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏ぃ┡c高分辨率熔解曲線分析(HRMA)結(jié)合起來,成本低而且速度快。在重亞硫酸鹽處理之后進(jìn)行PCR擴(kuò)增,可以將三個(gè)氫鍵的GC轉(zhuǎn)變?yōu)閮蓚€(gè)氫鍵的AT,減少雙鏈DNA的結(jié)合強(qiáng)度。
在五對(duì)同卵雙胞胎中進(jìn)行了測(cè)試,通過口腔拭子收集了他們的DNA樣本。研究顯示,Alu-E2F3基因座的熔解曲線可以區(qū)分所有雙胞胎,而Alu-SP基因座的熔解曲線只能分辨四對(duì)同卵雙胞胎。這說明基因座的選擇是進(jìn)行有效分析的關(guān)鍵。研究人員還發(fā)現(xiàn),年紀(jì)zui大的一對(duì)雙胞胎,熔解溫度的差異也zui大。
隨著時(shí)間的推移環(huán)境能夠影響DNA甲基化,這是整個(gè)研究的基礎(chǔ)。但如果需要比較多年前收集的樣本與現(xiàn)在的樣本,甲基化分析就會(huì)遇到障礙,難以用于過去的案件。值得注意的是,同一個(gè)人的不同體液有著不一樣的DNA甲基化模式,需要比較同樣來源的體液。
盡管還存在一定的局限,HRMA代表著法醫(yī)學(xué)的一個(gè)重要里程碑。
ACTH (18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH(18-39)抗體
ACTH (7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH (7-23)抗體
ADNP 活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽抗體
Alpha 1 Acid Glycoprotein α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體
Alpha 1 acid glycoprotein 2 α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2)
phospho-AQP2(Ser264+261) 磷酸化水通道蛋白2抗體
ATTY 細(xì)胞酪氨酸轉(zhuǎn)氨酶抗體
Vasopressin 抗利尿激素/血管升壓素/加壓素/血管加壓素抗體
ABCF1 ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體
AKR1B1 醛糖還原酶抗體
Serum albumin 人血清白蛋白抗體
Anthrax 炭疽菌抗體(采用活疫苗制備)
ATF4 活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體
Adenylate Kinase 1 腺苷酸激酶-1抗體
F-Actin 纖維狀肌動(dòng)蛋白抗體
Agrin 聚集蛋白抗體
AIF 調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體
AIF 調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體
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