[目的要求]
1.了解光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造、成像原理及其使用方法。
2.學(xué)習(xí)臨時(shí)裝片及繪制生物圖的方法。
[材料用品]
材料：水綿營(yíng)養(yǎng)體
用品：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、小燒杯、滴管、尖咀鑷子、濾紙條、。
[方法與步驟]
一、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)
基本結(jié)構(gòu)可分為兩個(gè)部分：
(一)顯微鏡的光學(xué)部分
1.目鏡：由二、三片透鏡組成，安裝在鏡筒上端，也叫接目鏡。在目鏡上方刻有5×、10×、20×等為放大倍數(shù)。從外表上看，鏡頭越長(zhǎng)放大倍數(shù)越低。
2.物鏡：由數(shù)組透鏡組成，安裝在轉(zhuǎn)換器上，又稱接物鏡，每臺(tái)顯微鏡上常備有幾個(gè)不同倍數(shù)的物鏡，物鏡上所刻8×、10×、40×等就是放大倍數(shù)，習(xí)慣上把10－20倍的叫做低倍物鏡；40－60倍的叫做高倍物鏡；90－100倍的叫做油鏡。從形態(tài)上看，接物鏡越長(zhǎng)，放大倍數(shù)越高。
顯微鏡的放大倍數(shù)，粗略計(jì)算方法為接目鏡放大倍數(shù)與接物鏡放大倍數(shù)的乘積。如觀察時(shí)所用接物鏡為40×、接目鏡為10×，則物體放大倍數(shù)為40×10＝400倍。
3.集光器：位于載物臺(tái)下方。由二、三塊透鏡組成，其作用是聚集來(lái)自反光鏡的光線，使光度增強(qiáng)，并提高顯微鏡的鑒別力，集光器下面裝有光圈(可變光闌)，由十幾張金屬薄片組成，可以調(diào)節(jié)進(jìn)入集光器光量的多少。若光線過(guò)強(qiáng)，則將光圈孔口縮小，反之則張大，集光器還可以上下移動(dòng)，以調(diào)節(jié)適宜的光度。
4.反光鏡：具兩面，一面為平面鏡，一面為凹面鏡。其用途是收集光線。平面鏡使光線分布較均勻。凹面鏡有聚光作用，反射的光線較強(qiáng)，一般在光線較弱時(shí)使用。(有些顯微鏡可自帶光源，因而沒(méi)有反光鏡)
(二)機(jī)械部分
1.鏡座：在顯微鏡的底部，用于支持整個(gè)顯微鏡。
2.鏡柱、鏡臂和傾斜關(guān)節(jié)：鏡座上的直立短柱叫做鏡柱。鏡柱上方的彎曲的弓形部分叫做鏡臂，是握鏡的地方。鏡臂和鏡柱之間有一個(gè)能活動(dòng)的傾斜關(guān)節(jié)，可使顯微鏡向后傾斜，便于觀察。
3.載物臺(tái)：鏡臂下端安裝的一個(gè)向前伸出的平面臺(tái)叫做載物臺(tái)。用于放置觀察用的玻片標(biāo)本，載物臺(tái)中央有一圓孔，叫通光孔。通光孔左右兩旁一般裝有一對(duì)彈簧夾，為固實(shí)玻片之用，有的裝有移片器，可使玻片前后左右移動(dòng)。
4.鏡筒：安裝在鏡臂上端的圓筒叫做鏡筒，上端安裝目鏡，下端連接轉(zhuǎn)換器。
5.物鏡轉(zhuǎn)換器：鏡筒下端的一個(gè)能轉(zhuǎn)動(dòng)的圓盤(pán)叫做轉(zhuǎn)換器。其上可以安裝幾個(gè)接物鏡，觀察時(shí)便于調(diào)換不同倍數(shù)的鏡頭。
6.準(zhǔn)焦螺旋：鏡臂上裝有兩種可以轉(zhuǎn)動(dòng)的螺旋，能使鏡筒上升或下降，稱為準(zhǔn)焦螺旋。大的螺旋轉(zhuǎn)動(dòng)一圈。鏡筒升降10毫米，用于調(diào)節(jié)低倍鏡，叫做粗準(zhǔn)焦螺旋。小的螺旋圍動(dòng)一圈，鏡筒升降0.1毫米。主要用于調(diào)節(jié)高倍鏡，叫做細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。
二、光學(xué)顯微鏡的成像原理
光學(xué)顯微鏡是利用光學(xué)的成像原理觀察植物體結(jié)構(gòu)，顯微鏡的成像原理如圖所示(掛圖)。
三、光學(xué)顯微鏡的使用
1.鏡檢環(huán)境
室內(nèi)一般應(yīng)該寬闊而清潔，地基堅(jiān)固沒(méi)有震動(dòng)，潮氣和塵埃很少，不應(yīng)放置腐蝕性的試劑。利用自然光做光源時(shí)，不宜用直射的太陽(yáng)光，以免對(duì)觀察者的眼睛造成傷害。一般利用陽(yáng)光的散射光，特別是天空或白云的反射光線。
2.顯微鏡的放置
將顯微鏡放置在實(shí)驗(yàn)臺(tái)桌面上，距實(shí)驗(yàn)臺(tái)邊緣約5cm。略偏于操作者左方，右側(cè)放繪圖紙等實(shí)驗(yàn)用具。
3.采光
扭轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器，使低倍鏡正對(duì)通光也，打開(kāi)聚光器上的光圈，然后左眼對(duì)準(zhǔn)接目鏡注視，右眼睜開(kāi)，用手翻轉(zhuǎn)反光鏡，對(duì)向光源，光強(qiáng)時(shí)用平面鏡，光較弱時(shí)用凹面鏡。這時(shí)從目鏡中可以看到一個(gè)明亮的圓形視野，只要視野中光亮程度適中，光就對(duì)好了。
4.裝置玻片標(biāo)本
將要觀察的玻片標(biāo)本，放在載物臺(tái)上，用彈簧夾或移光器將玻片固定。將玻片中的標(biāo)本對(duì)準(zhǔn)通光孔的中心。
5.低倍鏡的使用
將低倍鏡旋轉(zhuǎn)到中央，小心的將粗準(zhǔn)焦螺旋向下轉(zhuǎn)動(dòng)到離玻片約1cm左右。之后，再用粗準(zhǔn)焦螺旋把低倍鏡放下到離玻片2-3mm處,通過(guò)接目鏡觀察標(biāo)本,同時(shí)按反時(shí)針?lè)较蛴么譁?zhǔn)焦螺旋使鏡筒緩緩地上升,緩緩移動(dòng)玻片,直到看到物象為止，這時(shí)，進(jìn)一步用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋上下轉(zhuǎn)動(dòng)，使物象達(dá)到zui清晰的程度。
6.高倍鏡的使用
首先如上程序于低倍鏡下找到材料，然后再把需要用高倍鏡觀察的部分移到視野中央，用彈簧夾壓緊，不再移動(dòng)。換上高倍鏡，用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋上下轉(zhuǎn)動(dòng)，到出現(xiàn)清晰的物象為止。
7.油鏡的使用
(1)先用低倍鏡找到要觀察的物體，再換至高倍鏡，將物體置于視野中央，并使集光器所收集的光亮達(dá)到zui大。
(2)將鏡筒上旋，將香柏油加一小滴于集光器與蓋玻片上。
(3)將鏡頭緩緩放下，使油鏡浸入油滴，靠近觀察物體，然后邊觀察邊用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，由下向上調(diào)節(jié)，找到要觀察的物體。
(4)觀察完畢后，將鏡頭旋離玻片，用檫鏡紙檫去鏡頭上的香柏油。
四、臨時(shí)裝片
將要觀察的材料放在載玻片的水滴中，加蓋蓋玻片，以備顯微鏡下觀察，這種方法叫做臨時(shí)裝片，臨時(shí)裝片的優(yōu)點(diǎn)在于，新鮮材料組織不會(huì)破壞，可保持原來(lái)生活狀態(tài)，同時(shí)操作簡(jiǎn)便，不受設(shè)備條件限制，隨時(shí)隨地可以進(jìn)行。
制作臨時(shí)裝片時(shí)首先將載玻片，蓋玻片擦拭干凈，拭擦玻片動(dòng)作要輕,手指用力要均勻，否則易拭破。在載玻片中央，滴加一、二滴清水。然后用鑷子放水綿少許，放在載玻片上，再將蓋玻片輕輕蓋上，注意：為了不使其內(nèi)有氣泡，必須將蓋玻片先從一側(cè)放下，使接觸到水，然后慢慢放下，如仍有氣泡，可用鑷子輕輕加壓蓋玻片，或者解剖針對(duì)蓋玻片稍為提高，然后再放下，水不能過(guò)多，水量過(guò)多，則蓋玻片易浮動(dòng)，這時(shí)可用小濾紙條將水分吸干，如水分過(guò)少，水沒(méi)有填滿蓋玻片，可以側(cè)面用滴管加水少許。總之，應(yīng)使蓋玻片緊貼載玻片，不能浮動(dòng)，這樣才利用觀察。
zui后拭干玻片四周的水分，置顯微鏡下觀察。
臨時(shí)裝片技術(shù)，是本課程實(shí)驗(yàn)課zui常用的基本技術(shù)，要求每個(gè)同學(xué)反復(fù)練習(xí)，熟練掌握。
五、生物繪圖法
生物實(shí)驗(yàn)圖不同于一般美術(shù)圖，也不同于機(jī)械制圖。生物繪圖要求將標(biāo)本的外形和內(nèi)部結(jié)構(gòu)準(zhǔn)確的措施下來(lái)，然后詳加說(shuō)明，要求形象自然，比例適當(dāng)，線條清晰。
生物繪圖一般用點(diǎn)、線表示，輪廓用線條描繪，明暗程度、物質(zhì)含量多少等則用細(xì)點(diǎn)的蔬密表示之，圖紙應(yīng)選擇能夠用橡皮拭擦的上好白紙，繪圖時(shí)先用中軟鉛筆繪出輪廓，然后用較硬的鉛筆繪出全圖，圖中各部分應(yīng)注字說(shuō)明，圖與字之間用水平細(xì)線連系之，圖的標(biāo)題填在圖的下方。
很多細(xì)小生物體或解剖結(jié)構(gòu)是通過(guò)顯微鏡觀察認(rèn)識(shí)的。因此要逐步訓(xùn)練用左眼觀察，右眼看圖紙。將觀察結(jié)果準(zhǔn)確地描繪出來(lái)。
