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多克隆抗體的制備

時(shí)間:2016/8/5閱讀:539
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免疫一周后,可以耳動脈取血檢測抗體效價(jià)。因?yàn)槠鸪鯉状蚊庖弋a(chǎn)生的抗體的效價(jià)比較低,頭兩次取血,夠檢測用即可。在三次免疫后,可以獲得較價(jià)的抗體,每次取血量可以在40ml,不要取太多,否則會造成兔子貧血。

前幾次取血用19號針頭對兔子進(jìn)行耳動脈取血,室溫過夜析出血清。

zui后一次取血可以采用頸動脈放血,具體操作如下:

1、家兔仰臥于兔架上固定頭部,用紗布固定四肢。頭部略放低以暴露頸部。剃毛并消毒皮膚。

2、沿頸部中線用手術(shù)刀切開皮膚約10cm,分離皮下結(jié)締組織,直至暴露出氣管兩側(cè)的胸鎖乳突?。ㄐ⌒牟僮?,如碰到小血管出血,可用止血鉗止血)。

3、用直頭止血鉗分離胸鎖乳突肌與氣管間的頸三角區(qū)疏松組織,暴露出頸總動脈后用彎頭眼科鑷使之游離,剝離神經(jīng)和結(jié)締組織。

4、于動脈下套入兩根黑絲線,分別置于遠(yuǎn)心及近心端。結(jié)扎遠(yuǎn)心端的絲線。近心端的動脈用血管夾夾住。

5、用小拇指墊在血管下,用尖頭眼科手術(shù)剪在兩根絲線間的動脈璧上剪一小口(勿剪斷),插入塑料放血管。再將近心端的絲線結(jié)扎固定于放血管上,以防放血管滑脫。

6、松開止血鉗,使血液流入容器中。一般一只家兔可放血100-120ml。

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