酶免疫技術(shù)的特點(diǎn):
一、酶和酶作用的底物
1.辣根過(guò)氧化酶(HRP):HRP在蔬菜作物辣根中含量很高,純化方法也不復(fù)雜。它是一種糖蛋白,含糖量約18%;分子量為44kD;是一種復(fù)合酶,由主酶(酶蛋白)和輔基(亞鐵血紅素)結(jié)合而成的一種卟啉蛋白質(zhì)。主酶為無(wú)色糖蛋白,在275nm波長(zhǎng)處有zui高吸收峰;輔基是深棕色的含鐵卟啉環(huán),
二、酶標(biāo)記抗體或抗原
酶標(biāo)記的抗原或抗體稱為結(jié)合物(conjugate)??乖捎诨瘜W(xué)結(jié)構(gòu)不同,可用不同的方法與酶結(jié)合,如為蛋白質(zhì)抗原,基本上可參考抗體酶標(biāo)記的方法。制備抗體酶結(jié)合物的方法通常有以下幾種。醫(yī) 學(xué)教育網(wǎng)原創(chuàng)
三、固相載體
酶免疫技術(shù)的主要試劑為固相的抗原或抗體、酶標(biāo)記的抗原或抗體和與標(biāo)記酶直接關(guān)聯(lián)的酶反應(yīng)底物。可作固相載體的物質(zhì)很多,zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后保留原來(lái)的免疫活性。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式,在測(cè)定過(guò)程中,它作為載體和容器,不參與化學(xué)反應(yīng),加之它的價(jià)格低廉,所以被普遍采用。