通過在支持物(如蓋玻片)上培養(yǎng)貼壁細(xì)胞，可以應(yīng)用抗體檢測細(xì)胞表面抗原的表達(dá)或進(jìn)行酶細(xì)胞化學(xué)以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。該方法的優(yōu)點(diǎn)是細(xì)胞貼壁牢固，能夠維持細(xì)胞生長時(shí)的狀態(tài)。

一、材料

1．待培養(yǎng)細(xì)胞。

2．試劑75％乙醇、蒸餾水、培養(yǎng)液。

3．器具蓋玻片、蓋玻片鑷、6孔培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿、紗布。

二、操作步驟

1．用蓋玻片鑷將蓋玻片從75％乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布。

2．將蓋玻片輕輕放人6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2～3片)。

3．將6孔培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿放在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20～30cm處照射2～3h。

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入6孔培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中。

5．將6孔培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中放在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2～3d，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2／3面積時(shí)，將6孔培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿取出，用蓋玻片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

三、注意事項(xiàng)

1．玻片培養(yǎng)法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法。

2．所使用的蓋玻片應(yīng)為玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理。

3．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在O．5％多聚賴氨酸溶液中浸泡5～10min并自然晾干。