ELISA試劑盒檢測的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等,不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。實驗樣本的處理可謂是ELISA實驗的要害進程之一,所以科研朋友一定要多加留心。具體要害那么就由小編來為您分析吧!
一、均質
①組織樣本:肉、肝食品類切細,用絞肉機重復絞碎,混合均勻。
②水產樣本:去除樣品的非食用部分,食用部分切細,用均質器均漿;質料表面較臟時,需適當用蒸餾水清洗。
③蛋類:鮮蛋去殼,蛋黃和蛋白充分混勻。
④生果、蔬菜類:先用水洗去泥沙,然后除去表面的水分,取食用部分。
二、振蕩提取
將提取溶劑參與到裝有樣品的具塞容器中,振蕩,使提取溶劑與容器內的樣品充分接觸以深化到樣本組織內部,提取待測組分。
①振蕩方法:振蕩器上進行上下、往復式振蕩、手搖式上下振蕩。
②在組織樣本中參與有機溶劑之間提取時,應邊加邊振蕩,避免組織凝集成團,不利于提取。
三、乳化現(xiàn)象
在用有機溶劑提取進程中,假如出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,處理的方法有:
①用細頭悄悄的攪拌,損壞乳化后,再重復離心。
②再參與適量的提取劑,從頭振蕩。留心離心后要確保樣本的稀釋倍數(shù)不變。
四、濃縮
由于凈化進程中引入的溶劑,可能會降低待測組分的濃度或許不適宜直接分析,需求去除悉數(shù)有機溶劑。即試劑盒前處理進程中把樣本在60℃氮氣下吹干,再用復溶液溶解單調殘留物。
濃縮方法:氮氣吹干除雜、壓縮空氣吹干除雜。
請留心:
①在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,避免雜質煩擾。
②在吹樣本時,針頭應在液面上空,避免與樣本接觸,避免產生穿插污染。
③樣本吹干后應當即取下,避免吹的時刻過長,影響zui終檢測成果。
④不同的藥物,吹干后樣本的保質期不同,發(fā)起待樣本回到室溫后當即復溶。
五、凈化
通過提取的待測組分中通常含有一些會煩擾試劑盒中抗原抗體反應的雜質或許是含有與待測物結構類似的雜質。將待測組分與雜質分別的進程,我們稱為試劑盒中樣本的凈化。在我們現(xiàn)有的試劑盒前處理方法中涉及到的zui常見的凈化是:液液分配法。
比如:用復溶液溶解單調殘留物之前先參與適量的正己烷,在參與正己烷和復溶液渦動后假如出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,可以60℃水浴加熱,至乳化現(xiàn)象消失或削弱后,加大離心轉速進行離心。
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