人體內的mRNA及microRNA (miRNA)不僅是胞內通訊的信號分子,而且很多研究已經表明,它們可以作為臨床診斷的分子標記物.為了更好地加強對它們的理解和應用,迫切需要對它們的物理性質也進行深入研究.在該實驗中,研究者們利用實時定量PCR技術檢測了精液特異的mRNAs、miRNAs及piRNAs.雖然通過time-course分析表明,cfs-miRNA的穩(wěn)定性與cfs-mRNA相似,但是對精漿采用過濾及Triton X-100處理后,cfs-miRNA及cfs-mRNA總量的變化特征卻是不同的,這暗示了它們可能有不同的物理性質.
隨后,精液的超微小泡(SMVs)被恢復,并定量檢測了SMVs中的cfs-mRNA及cfs-miRNA的含量.結果顯示:SMVs內cfs-mRNAs的含量幾乎與其重量一致,并且在不同大小的SMVs中高度可變.然而,大多數(shù)的cfs-miRNA卻獨立于SMVs存在于上層清液.之后,研究者們又通過對上層清液過濾及蛋白酶K的消化,進一步研究了cfs-miRNA.他們發(fā)現(xiàn):cfs-miRNA可以通過0.10μm大小的孔,但在蛋白酶K的強烈消化后被顯著降解了.這項研究表明:cfs-mRNA主要存在于SMVs內,而大部分的cfs-miRNA結合于蛋白復合體.該結果闡明了人類精液中胞外RNAs的穩(wěn)定性、來源及潛在功能,為它們作為生殖系統(tǒng)標記物的應用研究提供了幫助.
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