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應(yīng)客戶們對(duì)年前商品預(yù)購(gòu)的要求,今天開端逐步安排發(fā)貨,具體內(nèi)容公司業(yè)務(wù)員會(huì)及時(shí)聯(lián)絡(luò)。新年的開端中,公司技能專員為ELISA檢查試劑盒新手入門的運(yùn)用技能陳述做出一番收拾,在這里共享給您供參閱。
ELISA試劑盒辦法原理
1.雙抗體(原)夾心法:檢查抗原(體)的多見辦法,運(yùn)用針對(duì)抗原兩個(gè)不同決定族的兩種單抗別離作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢查溶液中的抗原(適用于二價(jià)以上抗原,不能測(cè) 小分子半抗原)。
2.間接法:檢查抗體的辦法,運(yùn)用酶符號(hào)的抗抗體(第二抗體)檢查已與固相抗原結(jié)合的抗體。
3.競(jìng)賽法:檢查抗原或小分子半抗原、抗體,以測(cè)抗原為例,使待測(cè)抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)賽與固相抗體結(jié)合,結(jié)果如待測(cè)抗原含量越多,與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少,顯色越淺,二者呈負(fù)相關(guān)。
操作留意
① 運(yùn)用潔凈的塑料容器裝備洗刷液,運(yùn)用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
② 洗刷酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充沛拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反響孔中吸水。
③ 底物A應(yīng)蒸發(fā),防止長(zhǎng)期翻開蓋子。底物B對(duì)光靈敏,防止長(zhǎng)期暴露于光下。防止用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
ELISA試劑盒質(zhì)控分析
1.人員培訓(xùn)內(nèi)容包含:
①查驗(yàn)項(xiàng)目的根本原理(ELISA試劑盒原理);
②了解檢查竅門,了解易出差錯(cuò)的環(huán)節(jié)及難點(diǎn);了解檢查試劑功能(包含試劑盒構(gòu)成,包被片段及其構(gòu)成);
③了解檢查儀器的原理及功能;把握數(shù)據(jù)處理的才能和質(zhì)量操控知識(shí);
④某些特別項(xiàng)目的檢查如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門安排的專門培訓(xùn)班,考試合格后持證上崗。
2.根本了解
① 1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技能運(yùn)用于臨床查驗(yàn)發(fā)展為ELISA試劑盒技能。
② 特色:ELISA試劑盒在固相外表拼裝免疫活性物質(zhì)構(gòu)成"免疫吸附劑"。
③ 酶符號(hào)免疫活性物質(zhì),進(jìn)行信號(hào)擴(kuò)大;
④ 有二步溫育反響二次洗刷進(jìn)程;
⑤ 靈敏度特異性相對(duì)較高。
⑥ 局限性:只能檢查到ng水平
⑦ 精密度差(批內(nèi)CV15-20%);
⑧ ELISA檢查試劑盒線性規(guī)模窄(一個(gè)數(shù)量級(jí));
⑨ 存在"HD-HOOK"效應(yīng)。
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